TY - JOUR ID - 84659 TI - تخلیص و تغلیظ ویروس هاری با استفاده از فیلتراسیون جریان مماسی (TFF) جهت تولید واکسن هاری دامی JO - مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research) JA - JVR LA - fa SN - 2008-2525 AU - خدایی پور, علی AU - افتخاری, زهره AU - افراسیابی, ارسلان AU - بیک زاده, بابک AU - جلوداری ممقانی, مهیار AD - دانش آموخته دانشگاه آزاد تهران شمال، تهران، ایران AD - بخش کنترل کیفیت، مجتمع تولیدی و تحقیقاتی، انستیتوپاستور ایران، کرج، ایران AD - گروه زیست شناسی سلولی مولکولی و میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری‌های زیستی، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران AD - دانش آموخته دانشکده دامپزشکی دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران Y1 - 2021 PY - 2021 VL - 76 IS - 3 SP - 372 EP - 380 KW - ویروس هاری KW - تخلیص KW - فیلتراسیون جریان مماسی (TFF) KW - قدرت و کارایی واکسن KW - واکسن DO - 10.22059/jvr.2020.293328.2994 N2 - زمینۀ مطالعه: جهت ساخت واکسن هاری دامی از سلول BHK-21 و ویروس سویه پاستور استفاده می‌شود. اگرچه پروتکل‌های مختلفی برای خالص‌سازی در پروسه تولید واکسن پیشنهاد شده ‌است لیکن این پروتکل‌ها اثرات منفی بر محصول نهایی دارند و نیازمند بهینه‌سازی می‌باشند.هدف: در مطالعه حاضر تلاش شد تا روش تغلیظ و خالص‌سازی ویروس مورد استفاده جهت ساخت واکسن هاری دامی بهینه‌سازی گردد.روش‎کار: ابتدا ویروس هاری سویه پاستور در سلول‌های BHK-21 به مدت ۵ روز با کمکDMEM ، ۷ درصد سرم جنین گاوی کشت داده‌ شد. سپس خالص‌سازی با استفاده از فیلتراسیون جریان مماسی (TFF) انجام شد. کیفیت ویروس‌های خالص‌سازی شده از طریق تیتراسیون ویروسی و الکتروفورز عمودی سنجیده شد. سپس غیرفعال شدن نمونه‌ها توسط بتاپروپیولاکتون انجام و در شرایط درون تنی و برون تنی مورد بررسی قرارگرفت. در نهایت، قدرت و کارایی واکسن فرموله شده با روش NIH مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج: مطالعه تیتراسیون ویروسی در نمونه‌های TFF نشان‌دهنده افزایش تیتر ویروسی در مقایسه با گروه کنترل بود (05/0P<). تجزیه و تحلیل ژل الکتروفورز عمودی نمونه‌های خالص‌ شده و تغلیظ شده نشان دادند ویروس‌هایی که با استفاده از TFF خالص‌سازی و تغلیظ شده ‌بودند در مقایسه با نمونه‌های تغلیظ نشده از خلوص بیشتری برخوردارند. علاوه بر این، در مطالعه ارزیابی قدرت و پتانسی واکسن افزایش 10 برابری قدرت و کارایی واکسن نیز مشهود بود.نتیجه­گیری نهایی: مطالعه حاضر نشان داد که استفاده از روش TFF برای حجم بالای مایع ویروسی جهت تغلیظ و تخلیص بسیار مناسب است و قابلیت اجرا در مقیاس صنعتی جهت افزایش میزان قدرت و کارایی واکسن تولید شده را دارد. UR - https://jvr.ut.ac.ir/article_84659.html L1 - https://jvr.ut.ac.ir/article_84659_fb8bcb1dc1880387c0eee8c96de7a796.pdf ER -