دانشگاه تهران مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research) 2008-2525 81 3 2026 09 23 Evaluation of Rapid Slide Feline Erythrocyte Agglutination and Inhibition Assays for the Diagnosis of Canine Parvoviral Infection ارزیابی روش‌های سریع آگلوتیناسیون اریتروسیت گربه و ممانعت آن روی لام برای تشخیص عفونت پاروویروسی سگ‌سانان 213 225 106183 10.22059/jvr.2025.389941.3489 FA سیما نیکخواه دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران امید مددگار گروه میکروبیولوژی و ژنتیک مولکولی، دانشگاه میشیگان، لنسینگ شرقی، میشیگان، ایالات متحده آمریکا، آمریکا حسام الدین اکبرین گروه بهداشت و کنترل مواد غذایی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0000-0003-3276-4649 ترانه بهنیاپور دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0009-0007-5823-6592 علی رحمانی فر دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0009-0006-3346-4233 نیلوفر ظریفیان دانش آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0009-0003-0909-1770 ایرج اشرافی تمای دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0000-0001-6784-3721 ماهان بیطرف متخصص داخلی بخش خصوصی، تهران، ایران 0009-0006-8132-2512 الناز کامرانی دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران شهرام جمشیدی گروه بیماری‎های داخلی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران 0000-0003-2182-2196 Journal Article 2026 04 15 BACKGROUND: Canine parvovirus is one of the leading causes of mortality in puppies. Rapid diagnosis of this disease plays a key role in the timely initiation of treatment and reduction of complications and fatal outcomes. However, despite their high diagnostic power, standard diagnostic methods face limitations in resource-limited conditions. In addition, the dependence of hemagglutination-based assays on specific biological resources, such as porcine erythrocytes, has limited their practical application in many clinical and field environments. From a clinical perspective, the availability of rapid diagnostic methods capable of detecting parvoviral antigens in fecal samples while simultaneously assessing the host immune response can be beneficial for early therapeutic decision-making. Nevertheless, such methods cannot replace standard assays with higher sensitivity and reproducibility. OBJECTIVES: This study aimed to develop and evaluate a slide agglutination test (SAT) for rapid detection of the virus in fecal samples and a slide inhibition test (SIT) for antibody detection in serum, as complementary and supportive tools alongside reference methods, particularly in resource-limited conditions. In this regard, feline erythrocytes were used as an accessible alternative to porcine erythrocytes.METHODS: SAT and SIT were performed using feline and rhesus erythrocytes on 33 fecal samples that tested positive by a rapid immunochromatographic assay. The tests were conducted at three different temperatures (4, 25, and 37 °C). The performance of these methods was evaluated based on PCR and cell culture results as reference standards, and the agglutination activity under different conditions was compared.RESULTS: The sensitivity and specificity of the SAT were estimated to be 92 % and 95%, respectively, and this assay showed close agreement with PCR results. The SIT was able to completely inhibit agglutination in all positive samples.CONCLUSIONS: The use of feline erythrocytes instead of porcine erythrocytes reduces some common limitations and facilitates the field application of SAT and SIT. These methods are not intended to replace standard diagnostic assays with higher sensitivity and reproducibility, but rather can serve as auxiliary screening tools in resource-limited settings to support improved management of canine parvoviral infection. زمینه مطالعه: پاروویروس سگ‌سانان یکی از مهم‌ترین علل مرگ‌ومیر در توله‌سگ‌ها می‌باشد. تشخیص سریع این بیماری نقش کلیدی در آغاز درمان به‌موقع و کاهش عوارض و تلفات دارد. با‌این‌حال روش‌های تشخیصی استاندارد موجود با وجود قدرت تشخیصی بالا، در شرایط کم‌امکانات با محدودیت مواجه‌ می‌باشند. علاوه‌بر‌این وابستگی آزمون‌های هماگلوتیناسیون به منابع بیولوژیک خاص، مانند اریتروسیت خوک، کاربرد عملی آن‌ها را در بسیاری از محیط‌های بالینی و میدانی محدود کرده است. از‌نظر بالینی، وجود روش‌های تشخیصی سریع که بتوانند آنتی‌ژن پاروویروس را در نمونه‌های مدفوع شناسایی کرده و هم‌زمان امکان بررسی پاسخ ایمنی میزبان را فراهم کنند، می‌تواند در تصمیم‌گیری‌های اولیه درمانی مفید باشد. با‌این‌حال چنین روش‌هایی نمی‌توانند جایگزین آزمون‌های استاندارد با حساسیت و تکرارپذیری بالا شوند.هدف: هدف از مطالعه حاضر، توسعه و ارزیابی آزمون آگلوتیناسیون روی لام (SAT) برای تشخیص سریع ویروس در نمونه‌های مدفوع و آزمون ممانعت از آگلوتیناسیون (SIT) برای شناسایی پادتن در سرم، به‌عنوان ابزارهای کمکی و مکمل در کنار روش‌های مرجع، به‌ویژه در محیط‌های با منابع محدود بود. در این راستا، از اریتروسیت‌های گربه به‌عنوان جایگزینی در‌دسترس به‌جای اریتروسیت خوک استفاده شد.روش‎کار: آزمون‌های SAT و SIT با استفاده از اریتروسیت‌های گربه و رزوس روی ۳۳ نمونه مدفوع با نتیجه مثبت در کیت سریع ایمونوکروماتوگرافی انجام شد. آزمون‌ها در ۳ دمای ۴، ۲۵ و ۳۷ درجه سانتی‌گراد اجرا شد. عملکرد این روش‌ها بر‌اساس نتایج PCR و کشت سلولی به‌عنوان استاندارد مرجع ارزیابی و میزان فعالیت آگلوتیناسیون در شرایط مختلف مقایسه شد.نتایج: حساسیت و ویژگی آزمون SAT به‌ترتیب 92 و ۹۵ درصد برآورد شد و این آزمون تطابق نزدیکی با نتایج PCR نشان داد. آزمون SIT نیز در تمام نمونه‌های مثبت قادر به ممانعت کامل از آگلوتیناسیون بود.نتیجه­گیری نهایی: نتایج مطالعه حاضر نشان می‌دهد استفاده از اریتروسیت گربه به‌جای خوک، برخی محدودیت‌های رایج را کاهش داده و کاربرد میدانی آزمون‌های SAT و SIT را تسهیل می‌کند. این روش‌ها نه به‌عنوان جایگزین آزمون‌های استاندارد با حساسیت و تکرارپذیری بالاتر، بلکه به‌عنوان ابزارهای غربالگری کمکی در محیط‌های با امکانات محدود می‌توانند در مدیریت بهتر عفونت پاروویروسی مورد استفاده قرار گیرند. https://jvr.ut.ac.ir/article_106183_8e3b2a4effc71ea03c4aed916d5a58cb.pdf