دانشگاه تهران مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research) 2008-2525 77 1 2022 03 21 Evaluation of Ostrich and Camel Sera as Alternatives to Commercial Fetal Bovine Serum in Axenic Culture of Leishmania tropica and Leishmania major Promastgotes ارزیابی سرم‌‌های شتر و شترمرغ به‎عنوان جایگزین‌‌های سرم جنین گاوی تجاری درکشت اگزنیک پروماستیگوت‌های لیشمانیا تروپیکا و لیشمانیا ماژور 1 9 87540 10.22059/jvr.2022.335622.3217 FA زهرا بابائی مرکز تحقیقات لیشمانیوز، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران آرش اسدی گروه انگل‌شناسی و قارچ‌شناسی، دانشکده پزشکی افضلی پور، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران ایرج شریفی مرکز تحقیقات لیشمانیوز، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران مهدی برهانی آزمایشگاه رفرانس بیماری‌‌ها و تحقیقات زئونوز، دانشکده دامپزشکی دانشگاه جیلین، چین امین احمدی گروه علوم پایه، آموزشکده دامپزشکی، دانشگاه اردکان، اردکان، ایران 0000-0002-3566-7134 علیرضا کیهانی مرکز تحقیقات لیشمانیوز، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران علی افگار مرکز تحقیقات بیماری هیداتید، دانشگاه علوم پزشکی کرمان، کرمان، ایران Journal Article 2022 02 14 BACKGROUND: RPMI 1640 is one of the most widely used culture media for the growth of microorganisms such as Leishmania, which is typically enriched with 10-30 % of fetal bovine serum (FBS) or calf serum (FCS) due to having growth factors such as micronutrients, trace elements, and hormones. OBJECTIVES: As a result of limitations such as the high cost of commercial sera and the recent propagation of ostrich and camel breeding in our country as well as the possibility of obtaining their sera comprising growth factors similar to FBS or FCS, we decided to compare different percentages of these sera with FBS regarding the growth of two Leishmania species. METHODS: 1×106/mL of Leishmania major and Leishmania tropica were cultured in RPMI 1640 in the presence of different percentages of 2.5-30 % related to all three sera; they were then counted, compared, and analyzed on different days up to the fourteenth day. RESULTS: The highest proliferation of both Leishmania species was observed in the presence of all percentages of FBS up to day 7. In media enriched with less than 5 % of both ostrich and camel sera, the growth of the two species of Leishmania was favorable; however,with the increase in the amount of these sera, the proliferation of both species decreased. While only 10 % of sera was compared, the highest growth of L. major and L. tropica was observed in the presence of FBS followed by camel serum. CONCLUSIONS: For 5 % and less concentrations, each ostrich and camel sera and for 10 %, only camel serum are recommended as substitutes for FBS in RPMI 1640 concerning the cultivation of L. major and L. tropicafor a week of incubation;if more than 15 percent is required, FBS is still the best option. زمینۀ مطالعه: محیط 1640RPMI، یکی از پرمصرف‌ترین محیط‌‌های مایع کشت جهت تکثیر میکروارگانیسم‌ها ازجمله لیشمانیا است که در این محیط به‌طور معمول از 30-10 درصد سرم جنین گاوی FBS)) یا گوساله (FCS) به دلیل داشتن فاکتور‌های رشد مانند ریز مغذی‌ها، عناصر کمیاب و هورمون‌ها استفاده می‌شود. هدف: با توجه به محدودیت‌‌هایی مانند گرانی سرم‌‌های تجاری و توجه ویژه به معرفی جایگزین مناسب و نیز رواج اخیر پرورش شترمرغ و شتر در کشورمان در سال‌‌های اخیر و همچنین امکان دستیابی به سرم‌‌های این حیوانات حاوی عوامل رشد مشابه با سرم جنین گاوی تجاری، بر آن شدیم تا تأثیر دو سرم را بر رشد پروماستیگوت‌‌های لیشمانیا تروپیکا و لیشمانیا ماژور در مقایسه با FBS در محیط 1640 RPMI بررسی کنیم. روش‎کار: یک میلیون پروماستیگوت در میلی‌لیتر از لیشمانیا ماژور و لیشمانیا تروپیکا در محیط 1640RPMI، در حضور درصد‌های مختلف 30-5/2 هر سه سرم کشت داده شدند و پس از آن، در روز‌های مختلف تا روز چهاردهم، شمارش، مقایسه و آنالیز شدند. نتایج: بیشترین میزان تکثیر هر دو گونه لیشمانیا در حضور تمام درصد‌های FBS و تا روز 7 پس از کشت مشاهده شد. در محیط‌‌های کشت با کمتر از 5 درصد دو سرم شترمرغ و شتر نیز رشد دو گونه لیشمانیا مطلوب بوده اما با افزایش میزان این سرم‌ها، از رشد هر دو گونه انگل کاسته شد. در صورت استفاده از سرم با غلظت 10 درصد، پس از FBS، بیشترین تکثیر پروماستیگوت دو گونه انگل، در حضور سرم شتر مشاهده شد. نتیجهگیری نهایی: در درصد‌های 5 و کمتر، هر یک از سرم‌‌های شترمرغ و شتر و برای 10 درصد، تنها سرم شتر به عنوان جایگزین FBS در محیط کشت هر دو گونه لیشمانیا و انکوباسیون کمتر از یک هفته پیشنهاد می‌شود، در حالی که در صورت نیاز به درصد‌های بیش از 15،FBS همچنان بهترین گزینه می‌باشد.

https://jvr.ut.ac.ir/article_87540_03ccf0e71cb3a318d09dfc81740b1624.pdf