به کارگیری روشهای ایمونوفلورسانس، ایمونودات و ایمونوبلاتینگ جهت شناسایی سویه های بیماریزای اشریشیاکلی واجد فیمبریه F11، در کلی باسیلوز طیور

نویسندگان

چکیده

تاکنون فیمبریه F11 فقط در سویه های بیماریزای اشریشیاکلی جدا شده از طیور، بوقلمون و انسان گزارش شده است. به منظور شناسایی این فیمبریه ابتدا 300 سویه از لاشه های طیور گوشتی مبتلا به کلی باسیلوز جداسازی و هر یک از آنها در محیط TSA چندیدبار پاساژداده شد تا فیمبریه F11 نمود یابد. در مرحله بعدی تعلیق باکتریایی تهیه شده از آنها با گلبولهای قرمز گروه خونی O انسان مجاور گردید و با افزودن قند مانوز سویه های واجد فیمبریه مقاوم به مانوز ( + MRHA ) مشخص شدند. سپس با استفاده از تعلیق باکتریایی و آنتی سرم اختصاصی ضد فیمبریه F11 خرگوشی، آزمایش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم انجام شد و برای انجام روشهای ایمونودات و ایمونوبلاتینگ ( وسترن بلات ) ابتدا عصاره فیمبریه خام از هر یک از سویه ها تهیه شد و بر روی آنها آزمایشهای مذکور صورت پذیرفت و در نهایت سروتیپ سویه هایی که در هر یک از آزمایشهای واجد فیمبریه F11 بودند، تعیین شد. بدین ترتیب در روش هماگلوتیناسیون تنها پنج سویه ( + MRHA) بودند و در روشهای ایمونوفلورسانس و ایمونودات، شش سویه واجد فیمبریه F11 تشخیص داده شدند. در ایمونوبلاتینگ نیز شش سویه واجد تحت واحر اصلی 18 کیلو دالتونی بودند که با آنتی سرم اختصاصی ضد فیمبریه F11 واکنش نشان دادند. تمامی سویه های واجد فیمبریه، متعلق به گروه سرمی O1 بودند.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

-

چکیده [English]

In this study for detection of FI I fimbriae on pathogenic E. coli 300 strains isolated from chickens with colisepticemia or colibacilosis were grown and subjected 3-6 consecutive passages on TSA. Bacterial suspension were mixed with human erythrocyte suspension. For testing mannose-resistant hemagglutination (MRI-IA+) mannose was add to the erythrocyte suspension. Rabbit antifimbrial (F ll) serum used to detection of fimbrial antigen on indirect immunofluorescence technique. Crude fimbrial extracts from isolates prepared for immunodot and immunoblotting. Results indicate that five of these strains showed mannose resistant hemagglutination of human erythrocytes when grown at 37C on TSA. On immunofluorescence and immunodot. six strains reacted with Fl I antiserum. On immunoblotting, six strains demonstrated 18-kDa major fimbrial subunit wich reacted with specific Fl I antiserum. All of the fimbriated strains belong to 01 serogroup

کلیدواژه‌ها [English]

  • Colibacillosis
  • Escherichia coli.
  • Fll fimbriae.
  • Poultry
مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research)
دوره 56، شماره 4 - شماره پیاپی 1345
225 مجله دانشکده دامپزشکی
بهمن 1380

فایل ها

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار