مجله تحقیقات دامپزشکی
(Journal of Veterinary Research)

مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research)

بلوغ آزمایشگاهی تخمکهای نارس شتریک کوهانه در محیط‌ها مزاف 10 همراه با غلظتهای مختلف سرم گوساله جنینی

نویسندگان
چکیده
هدف : انجام بلوغ آزمایشگاهی تخمک نارس شتریک کوهانه به منظور استفاده از آن در باروری آزمایشگاهی.
طرح : مطالعه مداخله‌ای.
حیوانات : تخمدان شترهای نحر در کشتارگاههای محلی.
روش : جمع آوری و انتقال تخمدانهای شترهای نحر شده در کشتارگاه در سرم فیزیولوژی استریل و در دمای 35-30 درجه سانتیگراد و حاوی آنتی بیوتیک، مکش فولیکول‌ها و جداسازی تخمکها و کشت آنها در محیط کشت سلول TC-199 و هامز اف 10 دارای صفر تا 10 درصد سرم گوساله جنینی توسط حرات غیر فعال شده، کشت تخمکها به مدت 48-36 ساعت در انکو باتور با حرارت 5/38 درجه سانتیگراد و 5 درصد گاز کربنیک، گرفتن سلولهای کومولوس، ثابت نمودن تخمکها و رنگ آمیزی آنها و سپس مطالعه آنها جهت ارزیابی میزان بلوغ تخمکها.
تجزیه و تحلیل آماری : آنالیز واریانس و در صورت وجود اختلاف معنادار، استفاده از آزمون دانکن.
نتایج : هنگامی که تخمدانهای منتقل شده به آزمایشگاه بلافاصله مورد استفاده قرار گرفت، میزان بلوغ تخمکهای نارس شتر یک کوهانه در محیط‌ها مزاف 10 بدون پروتئین کشت تنها 65/17 درصد بود در حالی که میزان بلوغ در محیطهای حاوی 5 درصد و 10 درصد پروتئین (به ترتیب 37 و 33 درصد) به طور معنی‌داری افزایش یافت (P<0/05)، اما این افزایش ارتباط معنی‌داری با افزایش غلظت پروتئین نداشت. هنگامی که تخمدانها 24 ساعت در یخچال نگهداری شده و بعدا مورد استفاده قرار گرفتند، میزان بلوغ تخمکها در محیط بدون پروتئین کشت تنها 54/14 درصد بود در حالی که میزان بلوغ در محیطهای حاوی 5 درصد و 10 درصد پروتئین (به ترتیب 86/25 و 33/33 درصد) به طور معنی‌داری افزایش یافت (P<0/05) ، در این آزمایش هر چند با افزایش غلظت سرم میزان بلوغ افزایش داشت ولی اختلاف آنها معنی‌دار نبود.
نتیجه‌گیری : در شرایط حاضر به نظر می‌رسد که بتوان تخمدانهای شتر را در سرمای 4 درجه سانتیگراد نگهداری و سپس مورد استفاده قرار داد.
کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله English

-

چکیده English

Objectives: To mature dromedary camel oocytes for using them in an IVF system.
Design: Interventional study.
Animals: Ovaries from dromedary camels in local slaughterhouses.
Procedure: Removing varies from camels in a local slaughterhouse, carrying them to the laboratory in warm saline solution, aspiration of follicles, isolation and transferring of oocytes into TCM-199 and Ham’s F10 supplemented with 0-10% heat inactivated fetal bovine serum (FBS), culturing oocytes for up to 24h in a C02 incubator. After culture oocytes were denuded and put into PBS containing 0.1% hyaluronidase and passing through a fine pipette. Oocytes were then mounted onto slide glass and fixed and stained for evidence of maturation.
Statistical analysis: ANOVA and when a significance different was seen, Duncan’s Multiple Range Test.
Results: When oocytes from fresh ovaries were culture in Ham’s F10 without protein, only 17.65% of them reached to MIT. However, significantly (P<0.05) higher oocytes reached to MIT in 5 and 10% FCS (36.84% and 33.33% for 5 and 10% FBS respectively), which were not dose dependent. When cool stored ovaries were used for oocyte maturation, 14.54% of oocytes reached to Mu. In protein- free medium However, significantly (P<0.05) higher oocytes reached to MI! in 5 and 10% FCS (25.86% and 33.3:3% for 5 and 10% FBS respectively). Although increasing the protein increased the maturation rates, the difference was not significant.
Conclusion: Under the present condition it seems that cool stored ovaries could be used for in vitro maturation of camel oocytes. J.Fac.Vet.Med. Univ. Tehran. 60,2:143- 148,2005.

کلیدواژه‌ها English

Cool storage
Dromedary camel
FBS
Ham’s F10
in vitro maturation