ویروس تومور پستان موش (Mouse mammary tumor virus) به‌عنوان فاکتور خطر در سرطان سینه

نوع مقاله : میکروبشناسی و ایمنی شناسی

نویسندگان

1 دانش‌آموخته دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

2 گروه میکروبیولوژی و ایمنی‌شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

3 گروه میکروبیولوژی و زیست‌فناوری میکروبی، دانشکده علوم و فناوری زیستی، دانشگاه شهید بهشتی، تهران، ایران

10.22059/jvr.2024.372152.3418

چکیده

زمینه مطالعه: سرطان سینه (BC: Breast cancer) یکی از رایج‌ترین سرطان‌ها در سراسر جهان به‌ویژه زنان ایرانی است. میزان مرگ‌و‌میر در کشورهای توسعه‌یافته کاهش یافته است، اما تغییرات افزایش‌یافته‌ای در شیوع سرطان سینه وجود دارد. شواهد نشان داده است که عفونت‌های ویروسی می‌توانند به‌طور قابل‌توجهی در بیماری‌زایی BC نقش داشته باشند.
هدف: مطالعه حاضر با هدف بررسی مولکولی رابطه بین عفونت ویروس MMTV (Mouse mammary tumor virus) و سرطان سینه در ایران انجام شد.
روش‎کار: در‌مجموع 85 نمونه بافت سرطانی سینه و 85 بافت مجاور بافت سرطانی (بافت سالم) طی سال 1401 از زنان مراجعه‌کننده به بخش ویژه سرطان جمع‌آوری شد. روش nested-PCR به‌منظور تعیین حضور ژن env ویروس MMTV در نمونه‌های جمع‌آوری‌شده، انجام شد. به‌منظور تأیید حضور ژن  envویروس MMTV، محصولات PCR برخی از نمونه‌های آلوده به ویروس MMTV تعیین توالی شدند.
نتایج: براساس روش nested-PCR، ژن env ویروس MMTV به‌ترتیب در 8/18 درصد (18 نمونه) و 85/2 درصد (2 نمونه) از 85 نمونه بافت سرطانی سینه و نمونه‌های کنترل شناسایی شدند. اکثر نمونه‌های تومور بدخیم آلوده به ویروس MMTV در مرحله III بودند. نتایج درخت فیلوژنی برای ژن env ویروس MMTV نشان داد که تمام جدایه‌ها در clade ویروس تومور سینه انسانی (HMTV) قرار دارند.
نتیجه­گیری نهایی: نتایج مطالعه حاضر با استفاده از روش nested-PCR احتمال رابطه‌ای بین سرطان سینه در انسان و عفونت ویروس تومورزای پستان موش را در ایران اثبات کرد. ویروس MMTVیکی از فاکتورهای اصلی خطر برای سرطان سینه می‌باشد.

کلیدواژه‌ها

موضوعات

عنوان مقاله [English]

Mouse Mammary Tumor Virus as a Risk Factor for Breast Cancer

نویسندگان [English]

  • Hassan Vahidi Emami 1
  • Arash Ghalyanchi Langeroudi 2
  • Seyed Masoud Hosseini 3
  • Hamideh Najafi 2
1 Graduated from the Faculty of the Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
2 Department of Microbiology and Immunology, Faculty of the Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
3 Department of Microbiology and Microbial Biotechnology, Faculty of Life Sciences and Biotechnology, Shahid Beheshti University, Tehran, Iran
چکیده [English]

BACKGROUND: Breast cancer is one of the most common cancers in the world, particularly among Iranian women. Although its mortality rate has decreased in developed countries, breast cancer incidence has increased. Accumulating evidence has indicated that viral infections could be significantly implicated in the pathogenesis of breast cancer.
OBJECTIVES: The current study is a molecular investigation of the correlation between mouse mammary tumor virus (MMTV) infection and breast cancer in Iran.
METHODS: In the cross-sectional study, 85 breast cancer tissue samples and 85 adjacent tumor samples (normal tissue) were collected from women referred to general hospitals in 2022. The nested-PCR technique was performed to determine the presence of the env gene of MMTV in the collected samples. To confirm the presence of the env gene of MMTV, PCR products of some MMTV-positive samples were subjected to direct sequencing.
RESULTS: Based on the nested-PCR technique, the env gene of MMTV was detected in 18.8% (18/85) and 2.85% (2/85) of breast cancer tissues and control samples, respectively. Most malignant tumor samples infected with MMTV were grade III. The constructed phylogenetic trees for the env gene of MMTV  showed all isolates belonged to the human breast tumor virus clade.
CONCLUSIONS: The results of the current study, using a nested-PCR technique, demonstrate a possible relationship between human breast cancer and MMTV infection in women of Iran. MMTV is one of the major risk factors for breast cancer.

کلیدواژه‌ها [English]

  • env gene
  • Breast cancer
  • Nested-PCR technique
  • Mouse mammary tumor virus (MMTV)
  • Retrovirus

اصل مقاله

مقدمه

سرطان نتیجه خروج سلول‌‌ها از مسیرهاى درست تنظیمى، تکثیری و تمایزی است. خودکارآمدى در سیگنال­هاى رشد، غیرحساس شدن به سیگنال­هاى مهارکننده رشد، اجتناب از مرگ سلولى برنامه‌ریزى‌شده، پتانسیل نامحدود تکثیر، حفظ رگ‌زایى، تهاجم بافتى و متاستاز به بدخیم شدن سرطان منجر می­شوند (1).

سرطان سینه یک بیماری چندمرحله‌ای می­باشد. میزان مرگ‌و‌میر سرطان سینه در زنان ایرانی 33/4 در هر 100000 نفر است که نسبت به انواع دیگر سرطان بیشتر است. عوامل مهم و تعیین‌کننده سرطان سینه شامل سن، سابقه سرطان سینه در فرد، سابقه خانوادگی مثبت و تغییرات ژنتیکی خاص می­باشد. سابقه قاعدگی و بارداری، هورمون‌‌ها نظیر استروژن، نژاد، نداشتن تحرک بدنی، نوشیدن الکل و تراکم سینه از عوامل تأثیرگذار می‌باشند (2). همچنین فاکتورهای محیطی که فاکتورهای خارجی نامیده می‌شوند، شامل عوامل فیزیکی یا تشعشعات (مثل اشعه UV و اشعه X)، عوامل شیمیایی (مثل موتاژن‌‌ها و کارسینوژن‌ها) و عوامل عفونی (مثل باکتری­ها و ویروس­ها) دخیل می­باشند (3). ویروس­ها در حال حاضر به‌عنوان فاکتورهای علت‌شناسانه سرطان انسانی پذیرفته شده‌اند. تخمین زده می­شود که 15 درصد از تومورهای انسانی در سراسر جهان توسط ویروس­ها ایجاد‌‌ می‌شود (4).

ویروس­های انکوژنیک ازجمله ویروس­های هپاتیت B و C (Hepatitis B and C viruses)، ویروس اپشتاین بار (Epstein-Barr virus (EBV))، ویروس لوکمیای انسانی نوع 1 و 2 (Human T-cell leukemia virus type 1 and 2)، هرپس ویروس انسانی 8 (Human herpes virus 8) و پاپیلوماویروس (Human papillomavirus (HPV)) در انواع سرطان­ها دخیل می­باشند (2، 5). مطالعات اپیدمیولوژیک گزارش کردند که ویروس تومورزای پستان موش (Mouse mammary tumor virus (MMTV)) در انسان بیماری­زا است که ارتباط نزدیکی با HERVs دارد (6، 7).

رتروویروس‌های سرطان‌زا با ادغام پروویروس در ژنوم میزبان باعث افزایش بیان انکوژن‌های سلولی می‌شوند و مدت زیادی است که برای مطالعه ایجاد و پیشرفت تومور در مدل‌های حیوانی مورد استفاده قرار می‌گیرند (8) و به دنبال آن بسیاری از انکوژن‌های سلولی به‌دلیل ارتباط آن‌‌ها با تومورهای ناشی از این نوع رتروویروس شناسایی شدند. در طی مطالعات انجام‌شده ویروس تومور پستان موش باعث ایجاد تومورهای سلول‌های اپیتلیال پستانی می‌شود. MMTV برای اولین‌بار در دهه 1930 به‌عنوان یک عامل انتقال‌دهنده شیر در ارتباط با تومورهای پستانی در موش شناخته شد و برای مدت طولانی به‌عنوان یک مدل in-vivo برای مطالعه سرطان سینه انسان مورد استفاده قرار گرفت (9).

ویروس MMTV در ابتدا به‌عنوان یک رتروویروس ساده طبقه‌بندی‌‌ می‌شد. ژنوم رتروویروس‌های ساده از گلیکوپروتئین‌های مرتبط با گروه Gag، آنزیم‌های مورد‌نیاز برای تکثیر ژنوم (ترانس کریپتاز معکوس و اینتگراز؛ Pol/In) و پروتئین‌های انولوپ (Env) تشکیل شده است. در مقابل، ژنوم رتروویروس‌های پیچیده، مانند لنتی ویروس‌ها و دلتا ویروس‌ها، پروتئین‌های غیرساختاری را رمزگذاری می‌کنند که تکثیر ویروس در سلول میزبان را تسهیل می‌کنند یا در برابر پاسخ‌های ایمنی ذاتی یا در طی عفونت in-vivo مقابله می‌کنند. ژنوم ویروس MMTV حداقل سه پروتئین کمکی شناخته‌شده را رمزگذاری‌‌ می‌کند که به‌عنوان یک رتروویروس پیچیده در نظر گرفته‌‌ می‌شود. طول ژنوم آن 9 کیلوباز است و مانند همه رتروویروس‌ها دارای توالی با تکرارهای پایانی `5 و `3 (LTR: Long terminal repeat) است که در‌مورد MMTV بسیار طولانی می‌باشند (تقریباً 3/1 کیلوباز) و در کنار آن قرار دارد. 3' LTR‌ ویروس یکی از پروتئین‌های جانبی که تحت عنوان سوپرآنتی ژن (Sag) نامیده‌‌ می‌شود را کد‌‌ می‌کند. همچنین علاوه‌بر ناحیه کدکننده Sag، دارای محل‌هایی جهت اتصال به فاکتور رونویسی در ناحیه LTR‌‌ می‌باشد (10).

سرطان سینه ناشی از ویروس MMTV با ادغام کامل یا بخشی از ژنوم خود با استفاده از توالی انتهای LTR خود در ژنوم میزبان و ایجاد پروویروس به فعال‌سازی انکوژن‌های سلولی منجر می‌شود (11). علاوه‌بر‌این، پروتئین ناحیه Env در تومورزایی سینه نقش مهمی را ایفا‌‌ می‌کند.  Envویروس دارای یک موتیف فعال‌سازی مبتنی بر ایمنی تیروزین (ITAM) است که معمولاً در گیرنده‌های بیان‌شده در سلول‌های خون‌ساز یافت‌‌ می‌شود. بیان پروتئین Env در سلول‌های اپیتلیال پستان طبیعی موش یا انسان باعث ایجاد دگرگونی مورفولوژیکی در کشت سلولی‌‌ می‌شود (12).

ازآنجا‌که سیر بالینی سرطان اولیه سینه در هر بیمار متفاوت با سایر مبتلایان است، تعیین سرنوشت نهایی هر بیمار مشخص نیست و شناخت عواملی که بتوانند به‌طور مستقیم یا غیرمستقیم، سرنوشت نهایی بیماران را پیش‌بینی کنند، در تصمیم‌گیری بالینی و انتخاب درمان مفید می­باشد. مطالعات دو دهه اخیر نشان دادند مکانیسم­های مختلفی در شروع و پیشرفت سرطان سینه در سطح بافتی نقش دارند. مطالعه حاضر با هدف ردیابی پروویروس MMTV در نمونه‌های بافت سینه در افراد دارای سرطان سینه با استفاده از روش PCR-nested (بررسی وجود ژن env ویروس) انجام شد. روش PCR-nested روشی سریع و حساس‌‌ می‌باشد که برای طیف گسترده‌ای از ارگانیسم‌های مختلف با ویژگی بسیار بالا طراحی‌‌ می‌شود (13).

مواد و روش­ کار

جمع‌آوری نمونه: در مطالعه مقطعی حاضر، در‌مجموع 85 نمونه بافت سرطانی سینه و 85 نمونه از بافت حاشیه اطمینان (نمونه‌های سالم) طی سال‌های 1400-1401 از زنان مراجعه‌کننده به بخش ویژه سرطان بیمارستان­های عمومی استان قم جمع‌آوری شد. نمونه­های بافت سینه فیکس‌شده در فرمالین بودند و از زنان 33-71 سال تحت جراحی برای ماستکتومی به دست آمدند. از بافت مجاور بافت سرطانی به‌عنوان کنترل، نمونه گرفته شد.

آماده‌سازی نمونه‌های بافت: جهت آماده‌سازی نمونه‌های بافت فرمالینه قبل از استخراج ژنوم، طبق پروتکل کیت فاورپرپ (FavorPrepTM، ساخت تایلند)، 25 میلی‌گرم نمونه در تیوب­های 2 میلی‌لیتر قرار داده شد و به منظور حدف فرمالین از نمونه‌‌ها 1 میلی‌لیتر بافر PBS به هر تیوپ اضافه گشت. سپس نمونه‌‌ها توسط pestle یک بار مصرف و استریل تحت نیتروژن مایع خرد شد.

واکنش PCR: پرایمرهای مورد‌استفاده جهت شناسایی ویروس MMTV براساس ژن­ env با استفاده از نرم‌افزارCLC Sequence Viewer 6  طراحی شدند و بررسی آن‌‌ها به لحاظ ترمودینامیکی به کمک نرم‌افزار Gene runner انجام گردید (جدول 1).

به‌منظور اطمینان از صحت توالی‌های انتخاب‌شده و عدم اتصال پرایمرها به توالی‌های غیر‌اختصاصی ژنوم،BLAST  انجام شد. سپس این توالی‌‌ها توسط شرکت پیشگام (ایران) سنتز شدند.

تمام مراحل واکنش PCR در زیر هود بیولوژیک کلاس II انجام شد. کیت فاورپرپ (FavorPrepTM، ساخت تایلند) به‌منظور استخراج ژنوم مورد استفاده قرار گرفت. جهت تأیید استخراج DNA از نمونه‌های انسانی از تکثیر ژن GAPDH انسانی به‌عنوان کنترل داخلی استفاده شد. برای اطمینان از آلوده نبودن مخلوط واکنش تکثیری، از سرم خون انسان فاقد ویروس MMTV به‌عنوان کنترل منفی استفاده گردید. نمونه کنترل مثبت توالی سنتز‌شده قطعه 400 جفت بازی در باکس ژنی ژنenv  ویروس تهیه شد. واکنش nested-PCR  برای ژن env همراه با کنترل منفی با برنامه حرارتی در دور اول واکنش، شامل دناتوراسیون اولیه در دمای 94 درجه سانتی‌گراد (5 دقیقه، یک سیکل)، دناتوراسیون ثانویه در دمای 94 درجه سانتی‌گراد (1 دقیقه، 40 سیکل)، اتصال پرایمرها در دمای 53 درجه سانتی‌گراد (30 ثانیه، 40 سیکل)، تکثیر در دمای 72 درجه سانتی‌گراد (30 ثانیه، 40 سیکل) و تکثیر نهایی در دمای 72 درجه سانتی‌گراد (5 دقیقه، 1 سیکل) انجام شد. دور دوم واکنش شامل دناتوراسیون اولیه در دمای 94 درجه سانتی‌گراد (5 دقیقه، 1 سیکل)، دناتوراسیون ثانویه در دمای 94 درجه سانتی‌گراد (1 دقیقه، 40 سیکل)، اتصال پرایمرها در دمای 55 درجه سانتی‌گراد (30 ثانیه، 40 سیکل)، تکثیر در دمای 72 درجه سانتی‌گراد (45 ثانیه، 40 سیکل) و تکثیر نهایی در دمای 72 درجه سانتی‌گراد (5 دقیقه، 1 سیکل) صورت گرفت. واکنش PCR برای ژن GAPDH نیز شامل دناتوراسیون اولیه در دمای 94 درجه سانتی‌گراد (5 دقیقه، 1 سیکل)، دناتوراسیون ثانویه در دمای 94 درجه سانتی‌گراد (30 ثانیه، 30 سیکل)، اتصال پرایمرها در دمای 58 درجه سانتی‌گراد (30 ثانیه، 30 سیکل)، تکثیر در دمای 72 درجه سانتی‌گراد (40 ثانیه، 30 سیکل) و تکثیر نهایی در دمای 72 درجه سانتی‌گراد (5 دقیقه، 1 سیکل) انجام شد. در‌نهایت، محصول PCR روی ژل آگارز 1 درصد الکتروفورز و پس از رنگ‌آمیزی با Safe Stain (شرکت سیناکلون، ایران)، در دستگاه ژل داک بررسی گردید.

آنالیز سکانس: تعدادی از نمونه‌های مثبت MMTV به‌دست‌آمده به‌طور تصادفی انتخاب‌ شدند و به شرکت پیشگام (ایران) به‌منظور تعیین توالی فرستاده شدند و سپس با کمک نرم‌افزار MEGA-X version 10 درختچه فیلوژنی رسم شد.

آنالیز آماری: اطلاعات به‌دست‌آمده توسط نرم‌افزارهایSPSS  نسخه 22 و آزمون t آنالیز شد. اختلاف کمتر از 05/0P< معنی‌دار قلمداد گردید.

نتایج

مشخصات نمونه‌های جمع‌آوری‌شده: در‌مجموع 85 نمونه بافت سرطان سینه و 85 نمونه از بافت حاشیه اطمینان (نمونه‌های سالم) از زنان تحت جراحی جمع‌آوری شد. توزیع تومورها از‌لحاظ پاتولوژی بدین صورت بود: 78 نمونه کارسینوما تهاجمی داکتال، 6 نمونه کارسینوما لوبولار و 1 نمونه آدنوکارسینوما.

نتایج Nested-PCR و PCR: فراوانی ویروس MMTV براساس ژن  envدر بین 85 نمونه بافت سرطان سینه و کنترل به‌ترتیب 18 نمونه (1/21 درصد) و 2 نمونه (35/2 درصد) (05/0P<) بود (جدول 2). اکثر نمونه‌های بافت بدخیم آلوده به ویروس MMTV دارای درجه هیستولوژی II/III بودند. نتایج تکثیر ژن env ویروس MMTV در تصویر 1 نشان داده شده است.

درخت فیلوژنی مربوط به آن با کمک نرم‌افزار MEGA-X version 10 ترسیم شد. توالی‌های توافقی ژن env برخی از نمونه‌های جدا‌شده از استان قم در GenBank با شماره دسترسی PP097735- PP097745 ثبت شد. جهت بررسی توالی MMTVهای به‌دست‌آمده دو توالی ویروس تومورزایی اندوژن MMTV-8 و MMTV-1 با شماره دسترسی M22028 و AF22550، دو توالی ویروس اگزوژن، شامل C3H و Hej با شماره دسترسی AF228552 و AF228551، سه توالی ویروس تومور سینه انسانی (HMTV) با شماره دسترسی‌های AF346816،‌ DQ910869 و AY152722 در برنامه MEGA X.10 با استفاده از Clustal W ردیف‌خوانی و پیرایش گردید. توالی‌های همولوگ از خانواده رتروویروس‌های درون‌زای انسانی مرتبط با HERV-K به‌عنوان کنترل خارج گروه با شماره دسترسی‌های AF01262 و AF164612 استفاده شد. نتایج درختچه فیلوژنیک بر‌اساس توالی ژن env نشان داد تمام جدایه‌‌ها در clade ویروس تومور سینه انسانی (HMTV) قرار دارند (تصویر 2).

بحث

سرطان سینه یکی از شایع­ترین انواع سرطان است که هر ساله باعث مرگ‌و‌میر فراوانی در بین زنان و مردان می­شود و علی‌رغم پیشرفت­های بسیاری که در‌مورد تشخیص زودهنگام و درمان مناسب این بیماری صورت گرفته است، کماکان مهم‌ترین‌ سرطان کُشنده در بین زنان محسوب می‎شود (14). براساس مطالعات انجام‌شده در سال‌های اخیر، سرطان سینه فراوان‌ترین نوع سرطان در میان زنان ایران (سومین سرطان شایع) به شمار می­آید (15). برخلاف کشورهای غربی به نظر می­رسد سن شایع آن بین 35-44 سالگی باشد. این بدخیمی، 33 درصد سرطان­های زنان را تشکیل داده و مسئول 19 درصد از مرگ­‌های وابسته به سرطان است (16). بسیاری از مطالعات، رابطه‌ای احتمالی بین وجود عفونت ویروسی و پاتوژنز سرطان سینه را نشان داده‌اند که از‌جمله این ویروس‌ها، می‌توان به ویروس MMTV اشاره کرد. مطالعات متعددی از قسمت­های مختلف دنیا حاکی از وجود ژنوم این ویروس‌‌ها در بافت سرطانی سینه است. بدین ترتیب در مطالعه حاضر به بررسی ارتباط بین پروویروس MMTV در نمونه‌های بافت سینه در افراد دارای سرطان با استفاده از روش nested-PCR (بررسی وجود ژن env) پرداخته شد. تکنیک nested-PCR دارای حساسیت و ویژگی بالاتری نسبت به تست‌های سرولوژی است، زیرا این توانایی را دارد که تعداد بار ویروسی کم را شناسایی کند. در‌واقع، این روش حضور ویروس MMTV را در سلول‌های اپیتلیال بافت سینه انسان تأیید کرد (17).

برخی از مطالعات نشان داده‌اند یک ویروس مشابه MMTV، یعنی ویروس شبه MMTV، که به‌عنوان ویروس تومور سینه انسانی (HMTV) نیز شناخته‌‌ می‌شود، ممکن است یک عامل خطر برای BC انسان باشد (18). چندین مطالعه وجود توالی ژن env شبه MMTV را با شیوع در محدوده صفر تا 74 درصد موارد BC در چندین کشور نشان داده‌اند. در ژاپن، اتریش و بریتانیا شیوعی دیده نشد (19، 20). فراوانی  MMTV DNAبراساس ژن env در زنان مبتلا بهBC ، 18 از 85 نمونه (8/18 درصد) بود. سایر مطالعات از‌جمله در ایالات متحده آمریکا، پاکستان، ایران، آرژانتین، ایتالیا، تونس، مراکش، عربستان سعودی، کره، عراق، چین و استرالیا شیوع MMTV را به‌ترتیب 30-5/38 درصد (21-24)، 20 درصد (25)، 2/32 درصد (26)، 31 درصد (27)، 33 درصد (28)، 14 درصد (29)، 57 درصد (30)، 9/5 درصد (31)، 4/9 درصد (32)، 18/18 درصد (33)، 65/17 درصد (34) و 36-78 درصد (35-37) گزارش نمودند. همه این نتایج شواهدی است مبنی بر اینکه تشخیص ژن env متغیر است و در‌واقع در اکثر کشورهای جهان گسترده است.

ژن MMTV env در 2 نمونه از 85 نمونه (85/2 درصد) از بافت‌های کنترل سینه یافت شد. این فراوانی بالا بر‌خلاف مطالعه Wang و همکاران در سال 1995، Pogo و همکاران در سال 2010 و Melana و همکاران در ایالات متحده در سال 2001، 1-8/1 درصد بود (21، 22، 24). درصورتی‌که Ahangar و همکاران در سال 2014 (ایران، تبریز) (15)، Seo و همکاران در سال 2019 (کره) (32)،  Al-Dossary و همکاران در سال 2018 (عربستان سعودی) (31)، Lawson و همکاران در سال 2018 (استرالیا) (38)، Hachana و همکاران در سال 2008 (تونس) (29)، Etkind و همکاران در سال 2000 (ایالات متحده آمریکا) (23) و Zammarchi و همکاران در سال 2006 (ایتالیا) (28) توالی MMTV را در بافت سالم سینه انسان تشخیص ندادند. از سوی دیگر، Shariatpanahi و همکاران در ایران در سال 2017 (5 درصد) (26)، Melana و همکاران در آرژانتین در سال 2002 (10 درصد) (27)، Glenn و همکاران در استرالیا در سال 2012 (33 درصد) (37)، Wang و همکاران در چین در سال 2021 (4 درصد) (34) و Slaoui و همکاران در مراکش در سال 2014 (33 درصد) (30) درصد بالایی را در مقایسه با نتایج مطالعه حاضر گزارش کردند. تفاوت‌های زیادی در نتایج وجود دارد که به تعداد نمونه‌ها، روش شناسایی، موقعیت جغرافیایی مطالعه و سایر مشکلات ذاتی مانند کمبود ژنوم ویروس در نمونه‌ها، کیفیت DNA مورد استفاده و غیره نسبت داده می‌شود. بنابراین این داده‌‌ها بحث‌برانگیز باقی‌‌ مانده‌اند.

ارتباط یک عامل MMTV با سرطان سینه انسان بحث‌برانگیز است. وجود توالی‌های MMTV یا HMTV بررسی شده است، اما این توالی‌ها همیشه در بافت نرمال سینه یافت نمی‌شوند، به‌عنوان‌ مثال، توالی MMTV در 40 درصد از سرطان‌های سینه در زنان آمریکایی و استرالیایی یافت شده است، در‌حالی‌که توالی‌های ویروسی تنها در 1 درصد از بافت‌های سینه غیرمبتلا از همان بیماران شناسایی شده است (29، 39). در مطالعه حاضر، نتایج درختچه فیلوژنیک بر‌اساس توالی ژن env نشان داد تمام جدایه‌‌ها در clade ویروس تومور سینه انسانی (HMTV) قرار دارند. Pogo و همکاران در سال 2010 گزارش کردند که سرطان سینه تهاجمی در زنان آمریکایی شیوع بیشتری از توالی‌های ویروسی (71 درصد) نسبت به سرطان‌های متاستاتیک سینه نشان می‌دهد. بروز مشابهی در سرطان سینه تهاجمی از تونس و در سرطان سینه متاستاتیک مشاهده شد. ازآنجاکه این شرایط نشان‌دهنده بدخیمی‌های بسیار تهاجمی است، نتیجه‌گیری شده است که MMTV گاهی اوقات با یک فنوتیپ بدخیم خاص همراه است (39).

ویروس MMTV میلیون‌ها سال است که به‌عنوان یک ویروس عفونی در موش‌ها مطرح شده است که از ظرفیت‌های ژن‌های میزبان و فاکتورهای تنظیم‌کننده ایمنی از بیولوژی میزبان خود در جهت گسترش و بیماری‌زایی خود استفاده می‌کند. اگرچه ویروس MMTV باعث ایجاد تومورهای سینه می‌شود، اما این امر تا اواخر زندگی اتفاق نمی‌افتد و بنابراین ویروس همچنان باقی می‌ماند و مادران آلوده می‌توانند ویروس را به فرزندان منتقل کنند. بنابراین این ویروس می‌تواند یکی از عوامل خطر مهم سرطان سینه باشد و اجرای اقدامات پیشگیرانه از‌جمله تشخیص و کنترل به‌موقع عفونت MMTV می‌تواند در برنامه‌های پیشگیری از BC در ایران و جهان مؤثر باشد.

نتیجه‌گیری نهایی: نتایج مطالعه حاضر با استفاده از تکنیک nested-PCR یک رابطه 8/18 درصدی بین سرطان سینه انسان و ویروس MMTV در زنان ایرانی را بیان می­کند. این ویروس یکی از فاکتورهای خطر برای سرطان سینه محسوب می­شود که از موش به انسان منتقل‌‌ می‌گردد. بنابراین استفاده از این روش در کنار درمان سرطان توصیه می­شود. در‌واقع، در صورت وجود آلودگی به ویروس از داروهای ضدویروسی هم‌زمان با درمان سرطان استفاده شود تا از عود مجدد سرطان جلوگیری شود.

سپاسگزاری

نویسندگان از افرادی که در جمع‌آوری نمونه و آسیب‌شناسی حمایت نمودند، کمال تشکر دارند.

 

تعارض منافع

هیچ گونه تعارض منافعی در ارتباط با این مطالعه وجود ندارد.

مراجع

  1. Hanahan D, Weinberg RA. Hallmarks of cancer: the next generation. Cell. 2011;144(5):646-74. doi: 10.1016/j.cell.2011.02.013
  2. Buehring GC, Shen HM, Jensen HM, Jin DL, Hudes M, Block G. Exposure to bovine leukemia virus is associated with breast cancer: a case-control study. PloS one. 2015;10(9):e0134304 doi: 10.1371/journal.pone.0134304
  3. Fakhraei F, Haghshenas MR. Human papillomaviruses and cancer. J Pediatr Rev. 2013;22(98):340-60. doi: 10.18502/jmums.13i2.12729
  4. Lawson JS, Salmons B, Glenn WK. Oncogenic viruses and breast cancer: mouse mammary tumor virus (MMTV), bovine leukemia virus (BLV), human papilloma virus (HPV), and epstein–barr virus (EBV). Front Oncol. 2018;8:1. doi: 10.3389/fonc.2018.00001
  5. Khalilian M, Hosseini SM, Emami HV, Madadgar O. High fr‎equency of HPV genotypes 16 and 18 found in breast cancer patients: evidence for a more comprehensive HPV vaccination program in Iran.  J Adv Biomed  Sci. 2023;13(2):158-66. doi: 10.18502/jabs.v13i2.12729
  6. Buehring GC, Philpott SM, Choi KY. Humans have antibodies reactive with Bovine leukemia virus. AIDS Res Hum Retroviruses. 2003;19(12):1105-13. doi: 10.1089/088922203771881202
  7. Lee J, Kim Y, Kang CS, Cho DH, Shin DH, Yum YN, et al. Investigation of the bovine leukemia virus proviral DNA in human leukemias and lung cancers in Korea. JKMS. 2005;20(4):603-6. doi: 10.3346/jkms.2005.20.4.603
  8. Khodakaram-Tafti A, Razavi Z. Morphopathological study of naturally occurring ovine pulmonary adenocarcinoma in sheep in Fars province, Iran. IJVR. J Vet Res. (Shiraz University). 2010;11(2): 134. doi: 10.22099/IJVR.2010.155
  9. Bindra A, Muradrasoli S, Kisekka R, Nordgren H, Wärnberg F, Blomberg J. Search for DNA of exogenous mouse mammary tumor virus-related virus in human breast cancer samples. J Gen Virol. 2007;88(6):1806-9. doi: 10.1099/vir.0.82767-0
  10. Choi Y, Henrard D, Lee I, Ross S. The mouse mammary tumor virus long terminal repeat directs expression in epithelial and lymphoid cells of different tissues in transgenic mice. J Virol. 1987;61(10):3013-9. doi: 10.1128/JVI.61.10.3013-3019.1987
  11. Ross SR. Using genetics to probe host-virus interactions; the mouse mammary tumor virus model. Microbes Infect. 2000;2(10):1215-23. doi: 10.1016/s1286-4579(00)01275-2
  12. Katz E, Dubois-Marshall S, Sims A, Faratian D, Li J, Smith E, et al. A gene on the HER2 amplicon, C35, is an oncogene in breast cancer whose actions are prevented by inhibition of Syk. Br J Cancer. 2010;103(3):401-10. doi: 10.1038/sj.bjc.6605763
  13. Kolivand A. Haji Hajikolaei MR. Nouri M. Khosravi M. Gharibi D. Comparison to methods; Serum antibody ELISA and fecal nested-PCR to diagnose mycobacterium avium subspecies paratuberculosis subspecies infection in cattle. J Vet Res. 2023;78(1):1-21. doi: 10.22059/jvr.2023.348764.3299
  14. Howell A, Sims AH, Ong KR, Harvie MN, Evans DGR, Clarke RB. Mechanisms of disease: prediction and prevention of breast cancer—cellular and molecular interactions. Nat Rev Clin Oncol. 2005;2(12):635. doi: 10.1038/ncponc0361
  15. Ahangar-Oskouee M, Shahmahmoodi S, Jalilvand S, Mahmoodi M, Ziaee AA, Esmaeili H-A, et al. No detection of'high-risk'human papillomaviruses in a group of Iranian women with breast cancer. Asian Pac J Cancer Prev. 2014;15(9):4061-5. doi: 10.7314/apjcp.2014.15.9.4061
  16. Salehpour M, Meibodi NT, Teimourpour R, Ghorani-Azam A, Sepahi S, Rostami S, et al. Frequency of human papillomavirus genotypes 6, 11, 16, 18 and 31 in paraffin-embedded tissue samples of invasive breast carcinoma, North-East of Iran. Iran J Pathol. 2015;10(3):192. doi: 10.7508/ijp.2015.03.003
  17. Khalilian M, Hosseini SM, Madadgar O. Bovine leukemia virus detected in the breast tissue and blood of Iranian women. Microb Pathog. 2019;135:103566. doi: 10.1016/j.micpath.2019.103566
  18. Deligdisch L, Marin T, Lee AT, Etkind P, Holland JF, Melana S, et al. Human mammary tumor virus (HMTV) in endometrial carcinoma. Int J Gynecol Cancer. 2013;23(8):1423-8. doi: 10.1097/IGC.0b013e3182980fc5
  19. Fukuoka H, Moriuchi M, Yano H, Nagayasu T, Moriuchi H. No association of mouse mammary tumor virus‐related retrovirus with Japanese cases of breast cancer. J Med Virol. 2008;80(8):1447-51. doi: 10.1002/jmv.21247
  20. Mant C, Gillett C, D'Arrigo C, Cason J. Human murine mammary tumour virus-like agents are genetically distinct from endogenous retroviruses and are not detectable in breast cancer cell lines or biopsies. Virology. 2004;318(1):393-404. doi: 10.1016/j.virol.2003.09.027
  21. Wang Y, Holland JF, Bleiweiss IJ, Melana S, Liu X, Pelisson I, et al. Detection of mammary tumor virus env gene-like sequences in human breast cancer. Cancer Research. 1995;55(22):5173-9.
  22. Pogo BGT, Holland JF, Levine PH. Human mammary tumor virus in inflammatory breast cancer. Cancer. 2010;116(S11):2741-4. doi: 10.1186/s13027-016-0113-6 PMID: 28053656
  23. Etkind P, Du J, Khan A, Pillitteri J, Wiernik PH. Mouse mammary tumor virus-like ENV gene sequences in human breast tumors and in a lymphoma of a breast cancer patient. Clin Cancer Res. 2000;6(4):1273-8. doi: 10.1002/cncr.25179
  24. Melana SM, Holland JF, Pogo BG. Search for mouse mammary tumor virus-like env sequences in cancer and normal breast from the same individuals. Clin Cancer Res. 2001;7(2):283-4. doi: 10.1002/ijc.23372
  25. Naushad W, bin Rahat T, Gomez MK, Ashiq MT, Younas M, Sadia H. Detection and identification of mouse mammary tumor virus-like DNA sequences in blood and breast tissues of breast cancer patients. Tumour Biol. 2014;35:8077-86. doi: 10.3390 /ijerph17249496
  26. Shariatpanahi S, Farahani N, Salehi AR, Salehi R. High prevalence of mouse mammary tumor virus-like gene sequences in breast cancer samples of Iranian women. Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2017;36(10):621-30. doi: 10.1007/s13277-014-1972-3
  27. Melana SM, Picconi MA, Rossi C, Mural J, Alonio LV, Teyssié A, et al. Detection of murine mammary tumor virus (MMTV) env gene-like sequences in breast cancer from Argentine patients. Medicina. 2002;62(4):323-7. doi: 10.1080/15257770.2017.1360498
  28. Zammarchi F, Pistello M, Piersigilli A, Murr R, Cristofano CD, Naccarato AG, et al. MMTV‐like sequences in human breast cancer: a fluorescent PCR/laser microdissection approach. J Pathol Clin Res. 2006;209(4):436-44. doi: 10.3320/jkio.2002/45232
  29. Hachana M, Trimeche M, Ziadi S, Amara K, Gaddas N, Mokni M, et al. Prevalence and characteristics of the MMTV-like associated breast carcinomas in Tunisia. Cancer Lett. 2008;271(2):222-30. doi: 10.1002/path.1997
  30. Slaoui M, El Mzibri M, Razine R, Qmichou Z, Attaleb M, Amrani M. Detection of MMTV-Like sequences in Moroccan breast cancer cases. Infect Agent Cance. 2014;9:1-7. doi: 10.1016/j.canlet.2008.06.001
  31. Al Dossary R, Alkharsah KR, Kussaibi H. Prevalence of mouse mammary tumor virus (MMTV)-like sequences in human breast cancer tissues and adjacent normal breast tissues in Saudi Arabia. BMC cancer. 2018;18:1-10. doi: 10.1186/1750-9378-9-37
  32. Seo I, Cho J-H, Lee M-H, Park W-J, Kwon S-Y, Lee J-H. Clinical and prognostic value of human mammary tumor virus in Korean patients with breast carcinoma. Ann Clin Lab Sci. 2019;49(2):171-4. doi: 10.1186/s12885-018-4074-6
  33. Mohammed HA, Fırat M, Mansur ME. Molecular detection of mouse mammary tumor-like virus (MMTV-Like) in breast carcinoma for Iraqi female patients. Eur J Mol Clin Me. 2020;7(2):1533-66. doi: 10.1186/1750-8878-9-37
  34. Wang F-l, Zhang X-l, Yang M, Lin J, Yue Y-f, Li Y-d, et al. Prevalence and characteristics of mouse mammary tumor virus-like virus associated breast cancer in China. Infect Agent Cance. 2021;16(1):1-14. doi: 10.100/s13277-1972-3
  35. Nartey T, Mazzanti CM, Melana S, Glenn WK, Bevilacqua G, Holland JF, et al. Mouse mammary tumor-like virus (MMTV) is present in human breast tissue before development of virally associated breast cancer. Infect Agent Cance. 2017;12:1-7. doi: 10.1186/s13027-016-0113-6
  36. Lawson JS, Glenn WK, Salmons B, Ye Y, Heng B, Moody P, et al. Mouse mammary tumor virus–like sequences in human breast cancer. Cancer Res. 2010;70(9):3576-85. doi: 10.1371/journal.pone.0048788
  37. Glenn WK, Heng B, Delprado W, Iacopetta B, Whitaker NJ, Lawson JS. Epstein-Barr virus, human papillomavirus and mouse mammary tumour virus as multiple viruses in breast cancer. PloS one. 2012;7(11):e48788. doi: 10.1371/journal.pone.0048788
  38. Lawson JS, Salmons B, Glenn W. Oncogenic viruses and breast cancer Mouse mammary tumour virus (MMTV), bovine leukaemia virus (BLV), human papilloma virus (HPV), Epstein Barr virus (EBV). Front Oncol. 2018;8(1):1-18. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-09-4160
  39. Choi Y, Kappler JW, Marrack P. A superantigen encoded in the open reading frame of the 3′ long terminal repeat of mouse mammary tumour virus. Nature. 1991;350(6315):203-7. doi: 10.1038/350203a0
مجله تحقیقات دامپزشکی (Journal of Veterinary Research)
دوره 80، شماره 2
خرداد 1404
صفحه 111-119

فایل ها

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار