ارزیابی روش‌های سریع آگلوتیناسیون اریتروسیت گربه و ممانعت آن روی لام برای تشخیص عفونت پاروویروسی سگ‌سانان

نوع مقاله : میکروبشناسی و ایمنی شناسی

نویسندگان

1 گروه بیماری های داخلی ، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

2 گروه میکروبیولوژی و ژنتیک مولکولی، دانشگاه میشیگان، لنسینگ شرقی، میشیگان، آمریکا

3 گروه کنترل و بهداشت مواد غذایی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران

4 گروه بیماری های داخلی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

5 گروه بیماری‌های داخلی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

6 گروه بیماری های داخلی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

7 گروه میکروبیولوژی و ایمونولوژی، دانشکده دامچزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

8 دامپزشک بخش خصوصی

9 دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران

چکیده

زمینه مطالعه: پاروویروس سگ‌سانان یکی از مهم‌ترین علل مرگ‌ومیر در توله‌سگ‌ها به شمار می‌رود. تشخیص سریع این بیماری نقش کلیدی در آغاز درمان به‌موقع و کاهش عوارض و تلفات دارد. با این حال، روش‌های تشخیصی استاندارد موجود با وجود قدرت تشخیصی بالا، در شرایط کم امکانات با محدودیت مواجه اند. علاوه بر این، وابستگی آزمون‌های هماگلوتیناسیون به منابع بیولوژیک خاص، مانند اریتروسیت خوک، کاربرد عملی آن‌ها را در بسیاری از محیط‌های بالینی و میدانی محدود کرده است.
هدف: از نظر بالینی، وجود روش‌های تشخیصی سریع که بتوانند آنتی‌ژن پاروویروس را در نمونه‌های مدفوع شناسایی کرده و هم‌زمان امکان بررسی پاسخ ایمنی میزبان را فراهم کنند، می‌تواند در تصمیم‌گیری‌های اولیه درمانی مفید باشد. با این حال، چنین روش‌هایی نمی‌توانند جایگزین آزمون‌های استاندارد با حساسیت و تکرارپذیری بالا شوند. هدف این مطالعه، توسعه و ارزیابی آزمون آگلوتیناسیون روی لام (SAT) برای تشخیص سریع ویروس در نمونه‌های مدفوع و آزمون ممانعت از آگلوتیناسیون (SIT) برای شناسایی پادتن در سرم، به‌عنوان ابزارهای کمکی و مکمل در کنار روش‌های مرجع، به‌ویژه در محیط‌های با منابع محدود بود. در این راستا، از اریتروسیت‌های گربه به‌عنوان جایگزینی در دسترس برای اریتروسیت خوک استفاده شد.
روش کار: آزمون‌های SAT و SIT با استفاده از اریتروسیت‌های گربه و رزوس روی ۳۳ نمونه مدفوع با نتیجه مثبت در کیت سریع ایمونوکروماتوگرافی انجام شد. آزمون‌ها در سه دمای ۴، ۲۵ و ۳۷ درجه سانتی‌گراد اجرا گردید. عملکرد این روش‌ها بر اساس نتایج PCR و کشت سلولی به‌عنوان استاندارد مرجع ارزیابی و میزان فعالیت آگلوتیناسیون در شرایط مختلف مقایسه شد.
نتایج: حساسیت و ویژگی آزمون SAT به‌ترتیب 92 و۹۵ درصد برآورد شد و این آزمون تطابق نزدیکی با نتایج PCR نشان داد. آزمون SIT نیز در تمامی نمونه‌های مثبت قادر به ممانعت کامل از آگلوتیناسیون بود.
نتیجه‌گیری نهایی: نتایج این مطالعه نشان می‌دهد که استفاده از اریتروسیت گربه به‌جای خوک، برخی محدودیت‌های رایج را کاهش داده و کاربرد میدانی آزمون‌های SAT و SIT را تسهیل می‌کند. این روش‌ها نه به‌عنوان جایگزین آزمون‌های استاندارد با حساسیت و تکرارپذیری بالاتر، بلکه به‌عنوان ابزارهای غربالگری کمکی در محیط‌های با امکانات محدود می‌توانند در مدیریت بهتر عفونت پاروویروسی مورد استفاده قرار گیرند.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


عنوان مقاله [English]

Evaluation of Rapid slide Feline Erythrocyte Agglutination and Inhibition Assays for the Diagnosis of Canine Parvoviral Infection

نویسندگان [English]

  • Sima Nikkhah 1
  • Omid Madadgar 2
  • Hesameddin Akbarein 3
  • Tarane Behniapour 4
  • Ali Rahmanifar 5
  • Niloofar Zarifian 6
  • Irag Ashrafi tamai 7
  • Mahan Bitaraf 8
  • Shahram Jamshidi 9
1 Department of internal medicine, Faculty of veterinary medicine , University of Tehran, Tehran, Iran
2 Department of Microbiology and Molecular Genetics, Michigan university, East Lansing, Michigan, USA
3 Department of Food Hygiene & Quality Control, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran- Iran
4 Department of internal medicine, Faculty of veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
5 Department of internal medicine, Faculty of veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
6 Department of Internal medicine, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
7 Department of Microbiology and immunology, faculty of Veterinary medicine, university of Tehran, Tehran , Iran
8 Small animal practitioner
9 University of Tehran
چکیده [English]

Background: Canine parvovirus is one of the leading causes of mortality in puppies. Rapid diagnosis of this disease plays a key role in the timely initiation of treatment and reduction of complications and fatal outcomes. However, despite their high diagnostic power, standard diagnostic methods face limitations in low-resource settings. In addition, the dependence of hemagglutination-based assays on specific biological resources, such as porcine erythrocytes, has limited their practical application in many clinical and field environments.
Objective: From a clinical perspective, the availability of rapid diagnostic methods capable of detecting parvoviral antigens in fecal samples while simultaneously assessing the host immune response can be beneficial for early therapeutic decision-making. Nevertheless, such methods cannot replace standard assays with higher sensitivity and reproducibility. The aim of this study was to develop and evaluate a slide agglutination test (SAT) for rapid detection of the virus in fecal samples and a slide inhibition test (SIT) for antibody detection in serum, as complementary and supportive tools alongside reference methods, particularly in resource-limited settings. In this regard, feline erythrocytes were used as an accessible alternative to porcine erythrocytes.
Methods: SAT and SIT were performed using feline and rhesus erythrocytes on 33 fecal samples that tested positive by a rapid immunochromatographic assay. The tests were conducted at three different temperatures (4, 25, and 37 °C). The performance of these methods was evaluated based on PCR and cell culture results as reference standards, and agglutination activity under different conditions was compared.
Results: The sensitivity and specificity of the SAT were estimated to be 92% and 95%, respectively, and this assay showed close agreement with PCR results. The SIT was able to completely inhibit agglutination in all positive samples.
Conclusion: The results of this study indicate that the use of feline erythrocytes instead of porcine erythrocytes reduces some common limitations and facilitates the field application of SAT and SIT. These methods are not intended to replace standard diagnostic assays with higher sensitivity and reproducibility, but rather can serve as auxiliary screening tools in resource-limited environments to support improved management of canine parvoviral infection.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Canine Parvovirus
  • Diagnosis
  • Feline erythrocyte
  • Hemagglutination
  • Infectious Disease