بررسی میزان آلودگی مدفوعی اردکهای مناطق شمالی ایران به کمپیلوباکتر ژژونی و کمپیلو باکترکولای

نوع مقاله : میکروبشناسی و ایمنی شناسی

نویسندگان

1 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران

2 گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران

3 دانش آموخته دامپزشکی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه سمنان، سمنان، ایران

چکیده

زمینه مطالعه: در سال‌های اخیر میزان بروز مسمومیت غذایی ناشی از کمپیلوباکتر به تدریج افزایش یافته است. این باکتری  یکی از علل اصلی بیماری‌های عفونی گسترده در قرن گذشته می‌باشد. اگر چه ماکیان مهم ترین مخازن و منبع انتقال کمپیلوباکتر به انسان می‌باشند، اما آلودگی محیط با گونه‌های مختلف کمپیلوباکتر و ایجاد عفونت در انسان و حیوانات به وسیله مدفوع پرندگان آزاد وحشی مانند اردک را نمی‌توان نادیده گرفت.
هدف: هدف از این مطالعه بررسی میزان آلودگی مدفوعی کمپیلوباکتر ژوژنی  و کمپیلوباکتر کولای در اردک‌های آزاد برخی مناطق شمال ایران می‌باشد.
روش کار: در اردیبهشت ماه سال 95، تعداد 75 نمونه از مدفوع اردک‌های آزاد شهر‌های ساری، آمل، قائم شهر و بابل در استان مازندران جمع آوری شده و میزان حضور گونه‌های کمپیلوباکتر ژژونی و کولای بوسیله واکنش زنجیرهای پلیمرازسه گانه  مورد سنجش قرار گرفت. ژن‌های  16srRNA، mapA و ceuE  به ترتیب برای تشخیص جنس کمپیلو باکتر وگونه‌های کمپیلوباکتر ژژونی و کولای انتخاب شدند.
نتایج: از میان هفتاد و پنج نمونه مورد بررسی در این مطالعه، 13 مورد (17.33درصد) واجد کمپیلوباکتر تشخیص داده شدند.  از این تعداد یازده نمونه (84.6درصد) حاوی ژن  mapA و دو نمونه (15.4درصد)  واجد ژن  ceuE  بودند که به ترتیب به عنوان کمپیلوباکتر ژژونی و کمپیلوباکتر کولای معرفی گردیدند. میزان حضور کمپیلوباکتر ژژونی به طور معنی‌داری بیشتر از کمپیلوباکتر کولای گزارش گردید (0.5-0>P).
نتیجه گیری نهایی: نتایج این مطالعه نشان داد که شیوع کمپیلوباکتر در مدفوع اردک‌های آزاد مناطق شمالی ایران نسبتاًً بالاست و  خطر بالقوه‌ای برای  عفونت ناشی از این باکتری در انسان و بخصوص کودکان محسوب می‌شود

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Detection of Faecal Contamination With Campylobacter jujuni and Campylobacter coli in Urban Ducks in the North of Iran

نویسندگان [English]

  • Khatereh Kafshdouzan 1
  • Iradg Ashrafi tamai 2
  • Saba Pouyan 3
1 Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran
2 Department of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Tehran University, Tehran, Iran
3 Graduated from the Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran
چکیده [English]

BACKGROUND: The incidence of Campylobacter associated food-poisoning has gradually increased and it is considered to be the major cause of widespread infectious disease of the recent century. Although the poultry are the most important reservoirs and source of transmission of Campylobacter to human, urban wild birds like the ducks with faecal contamination of environment cannot be excluded from being the contributing source of Campylobacter spp. for human and animals.
Objectives: The aim of this study was to evaluate the faecal contamination of C.jujuni and C.coli in urban ducks in the North of Iran.
Methods:From March to April 2016, a total of 75 stool samples were collected from urban ducks in Sari, Amol, Ghaem Shahr and Babol, Mazandaran province, Iran to evaluate the presence of Campylobacter spp. using triplex PCR. 16srRNA, mapA and ceuE genes were targeted for Campylobacter spp., C.jujuni and C.coli respectively.
Results: 13 of 75 samples (17.33%) were contaminated with Campylobacter spp. Faeco prevalence of C.jujuni and C.coli was 84.6% and 15.4% .The prevalence of C.jujuni was significantly more (p< 0-0.5).
Conclusions: The results of this study have shown prevalence of Campylobacter spp. in urban ducks in the North of Iran is relatively high and may be considered a potential risk factor for human Campylobacteriosis in Iran, especially in children

کلیدواژه‌ها [English]

  • Fecal contamination
  • C. jujuni
  • C. coli
  • Duck
  • PCR

اعضاء جنس کمپیلوباکتر، یکی از مهمترین عوامل بیماریزای باکتریایی و از اصلیترین عوامل منتقل شده از طریق مواد غذایی آلوده در سراسر جهان محسوب میگردند (1،9،12،19). در میان گونه‌های مختلف این باکتری، کمپیلوباکتر ژژونی و کولای، مهمترین گونه‌های مسبب بیماری در انسان هستند. بیش از نیمی از گاستروانتریتهای انسانی توسط این باکتری‌ها ایجاد می‌شود که این میزان، از مجموع گاستروانتریتهای ایجاد شده توسط شیگلا، سالمونلا و اشریشیاکلی بیشتر است (6). اختلالات گوارشی و اسهال ناشی از این بیماری، حتی در کشورهای توسعه یافته، شمار زیادی از افراد، به خصوص کودکان را روانه بیمارستان میکند (1،9).

گونه‌های مختلف این  باکتری ممکن است علاوه بر اسهال آبکی و خونی، موجب بیماری‌های ثانویه‌ای نظیر مننژیت، سپتی سمی، سندروم اورمی همولیتیک و Guillain-Barre گردند (12،14،17). این باکتری گرم منفی، در دمای C° 42 و شرایط میکروآئروفیلیک به خوبی رشد میکند به همین خاطر قادر نیست به مدت طولانی در خارج از بدن میزبان زنده بماند. اما با توجه به تعدد میزبان‌ها (پرندگانو، نشخوارکنندگان، سگ، گربه و انسان) و شیوع زیاد آن، به فراوانی در طبیعت یافت می‌شود (9،11،12،17).

پرندگان اهلی و وحشی، یکی از اصلیترین میزبان‌های این باکتری هستند و مصرف گوشت آلوده و یا تماس با مدفوع آن‌ها، یکی از مهمترین منابع آلودگی جمعیت‌های انسانی محسوب میگردد. پرندگان خانگی و پرندگانی که در باغ‌های پرندگان و باغ وحش‌ها از آن‌ها نگهداری می‌شود و همچنین حیوانات خانگی به دلیل تماس نزدیکی که با انسان دارند، در اپیدمیولوژی این بیماری، از اهمیت زیادی برخوردارند (1،9،11). عفونت در پرندگان اغلب بدون علامت است که این مساله سبب دشواری در تشخیص و مبارزه با باکتری مولد آن میگردد. پرندگان حامل بدون علامت میتوانند به مدت زیادی باکتری را از طریق مدفوع خود دفع کرده و موجب انتشار آلودگی شوند (20).

حضور کمپیلوباکتر در مدفوع پرندگانی که همراه با انسانها زندگی میکنند نظیر اردک‌ها و حیوانات خانگی، ممکن است موجب آلودگی آب‌های سطحی، آب موجود در دریاچه ها و تفرجگاه ها و مناطق بازی کودکان شده و بهداشت عمومی جامعه را تهدید کند (1،4،11). حضور گونه‌های مختلف این باکتری در مدفوع پرندگانی نظیر اردک علاوه بر انتشار آلودگی در محیط، از طریق ایجاد آلودگی در گوشت و تخم مرغ،  ممکن است موجب انتقال باکتری از طریق مصرف مواد غذایی تهیه شده از گوشت و تخم اردک گردد. در سالهای اخیر با توجه به افزایش میزان بروز بیماری‌های قلبی-عروقی و توصیه به مصرف گوشت سفید، منابع پروتئینی جدید نظیر گوشت و تخم اردک نیز بسیار مورد توجه قرار گرفته است. از آنجا که پروتئین، آهن، سلنیوم و نیاسین به میزان کافی در گوشت اردک وجود دارد و میزان کالری آن نیز کمتر از گوشت گاو میباشد، گوشت اردک میتواند جایگزین مناسبی برای منابع پروتئینی و سایر مواد مغذی محسوب گردد (1).

اگرچه عفونت ناشی از کمپیلوباکتر به صورت خود محدود شونده است. اما از یک طرف ممکن است منجر به عوارض ثانویه‌ای نظیر Guillain-Barre گردد و از سوی دیگر با توجه به توانایی حمل ژن‌های مختلف مرتبط با حدت باکتریایی نظیر توکسین‌های گوارشی (cdt و ...) و عوامل مرتبط با مقاومت‌های آنتیبیوتیکی (1،9،12،13)، آلودگی محیط به این باکتری از اهمیت زیادی برخوردار است. به همین خاطر، درک بهتر توزیع گونه‌های مختلف کمپیلوباکتر در میزبان‌های مختلف و راه‌های انتقال آن در تدوین بهتر سیاستهای مربوط به کنترل و پیشگیری از بیماری‌های عفونی بسیار مؤثر است.

در مناطق شمالی ایران، اردک پرندهای است که به صورت سنتی همانند حیوانات خانگی در حیاط منازل نگهداری می‌شود و آلودگی آب‌های سطحی، معابر و محل بازی کودکان به مدفوع این پرنده اجتناب ناپذیر است. اگرچه عفونت ناشی از مصرف مواد غذایی آلوده به کمپیلوباکتر به طور گستردهای مورد مطالعه قرار گرفته است، اما انتقال این باکتری از طریق محیط آلوده به مدفوع دام‌های اهلی، پرندگان وحشی و حیوانات خانگی کمتر مورد بررسی قرار گرفته است. در ایران تاکنون مطالعه‌ای در ارتباط با میزان حضور کمپیلوباکتر در مدفوع اردک‌های آزاد مناطق شمالی صورت نگرفته است. در نقاط مختلف دنیا میزان آلودگی به گونه‌های کمپیلوباکتر در میزبان‌های مختلف، بسیار متغیر گزارش شده است. میزان آلودگی به کمپیلو باکتر ژژونی در محل پرورش و فرآوری گوشت اردک، در انگلستان در حدود 96.7 درصد گزارش گردیده و میزان آلودگی گوشت اردک بهکمپیلوباکتر ژژونی وکمپیلوباکتر کولای به ترتیب 12.5درصد و 87.5 درصد، بیان شده است (1) در حالی که بر اساس مطالعه Raeisi و همکاران که در سال 2017 انجام شد، در ایران میزان فراوانی کمپیلوباکتر ژژونی در گوشت اردک بیشتر از کمپیلو باکتر کولای می‌باشد (12).

با توجه به این که درک بهتر سهم نسبی عوامل مختلف محیطی در ایجاد عفونت ناشی از کمپیلوباکتر در طراحی اقدامات کنترلی مناسب و تامین بهداشت عمومی حائز اهمیت زیادی است (3،11)، هدف از این مطالعه بررسی میزان حضور کمپیلوباکتر ژژونی وکمپیلوباکتر کولای در مدفوع اردک‌های آزاد برخی مناطق شمالی ایران در نظر گرفته شد.

 

مواد و روش کار 

نمونه برداری: به منظور بررسی میزان حضور کمپیلوباکتر در مدفوع اردک‌های آزاد مناطق شمالی ایران، تعداد هفتاد و پنج نمونه مدفوع تازه اردک‌های به ظاهر سالم، طی اردیبهشت ماه سال 1395، از اردک‌های آزاد تعدادی از روستاهای اطراف شهرهای ساری، قائمشهر، بابل و آمل اخذ گردید. به منظور جلوگیری از مطالعه نمونه‌های مشابه، از هر کانون یک یا دو نمونه تهیه شد. هرنمونه به طور جداگانه در کنار یخ و در کوتاهترین زمان ممکن به آزمایشگاه میکروبیولوژی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران منتقل گردید.

استخراج DNA: با توجه به دشواری کشت و روش‌های بیوشیمیایی در شناسایی کمپیلوباکتر، استخراج DNA با استفاده از کیت AccuPrep Stool Genomic DNA Extractionا(Bioneer, Korea) صورت گرفت.

واکنش زنجیرهای پلیمراز: به منظور تشخیص جنس کمپیلوباکتر و گونه‌های ژژونی و کولای، از واکنش زنجیرهای پلیمراز  سه گانه بر پایه ژن‌های 16srRNA، mapA، و ceuE استفاده گردید (7،10،15،17). توالی پرایمرها (ساخت شرکت سینا کلون) و شرایط دمایی مورد استفاده در جدول شماره یک درج گردیده است. واکنش زنجیرهای پلیمراز در حجم نهایی µL 25 شامل ng 5 DNA، 0.1µmol از هریک از پرایمرها دو واحد Taq DNA polymerase،اmmol 200 dNTP، 2.5µL بافر 10X و mmol 2.5 کلرید منیزیوم (سینا کلون-ایران) صورت گرفت. تکثیر قطعۀ DNA توسط دستگاه ترموسایکلر (Techne TC- 512, England) انجام شد.

از نمونه تهیه شده در مجموعه میکروبی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران به عنوان کنترل مثبت (نمونه واجد هر سه ژن) و آب مقطر استریل به عنوان کنترل منفی استفاده گردید. محصولات به دست آمده در ژل آگارز  دو درصد با ولتاژ  80mV به مدت یک ساعت الکتروفورز گردید و پس از رنگامیزی با اتیدیوم بروماید، تحت تابش اشعه ماوراء بنفش مورد مشاهده قرار گرفت.

 

نتایج

از میان هفتاد و پنج نمونه مورد بررسی در این مطالعه، 13 مورد (17.33درصد) واجد کمپیلوباکتر تشخیص داده شدند.  از این تعداد یازده نمونه (84.6درصد)  حاوی ژن  mapA و دو نمونه (15.4 درصد)  واجد ژن  ceuE  بودند که به ترتیب به عنوان کمپیلوباکتر ژژونی و کمپیلوباکتر کولای معرفی گردیدند. میزان حضور کمپیلوباکتر ژژونی  به طور معنی‌داری بیشتر از کمپیلوباکترکولای گزارش گردید(0.5-0>P) (تصویر1).

جدول شماره یک: مشخصات پرایمرهای استفاده شده در این مطالعه

منبع

ژن هدف

دما و زمان لازم   برای واسرشت

اندازه

(bp)

توالی (3-5)

پرایمر

17

16SrRNA

S90-C° 59

408

AGTCTTGGCAGTAATGCACCTAACG

ATATGCCATTGTAGCACGTGTGTCG

CampF

CampR

 

17

mapA

S30-C° 50

589

CTATTTTATTTTTGAGTGCTTGTG

GCTTTATTTGCCATTTGTTTTATTA

 

MDmap A1

MDmap A2

17

ceuE

S30-C° 50

462

AATTGAAAATTGCTCCAACTATG

TGATTTTATTATTTGTAGCAGCG

COL3

MDCOL2

 

 

 

 

 

 

بحث

در کشور ما آمار دقیقی از میزان ابتلا به عفونت‌های ناشی از کمپیلوباکتر در دست نیست. اما از آنجایی که تحقیقات اخیر نشان میدهد میزان ابتلا به عفونت‌های ناشی از این باکتری در بسیاری از کشورهای توسعه یافته بسیار زیاد است. به نظر می‌رسد طیف گستردهای از عفونت‌های گوارشی ایجاد شده به خصوص در کودکان، در کشور ما نیز بر اثر این باکتری ایجاد می‌شود (9،12).

مطالعات مختلف صورت گرفته در ارتباط با ارزیابی میزان شیوع گونه‌های مختلف کمپیلوباکتر عمدتاًً بر منابع غذایی آلوده متمرکز شده است. امروزه در سراسر جهان، مصرف گوشت و فرآورده‌های طیور به عنوان اصلیترین منبع عفونت ناشی از کمپیلوباکتر شناخته شده (1،3،9،11،12) و مطالعه برروی انتقال باکتری از طریق محیط آلوده به مدفوع پرندگان وحشی نادر است (11). در کشور ما تاکنون مطالعه‌ای جهت ارزیابی میزان حضور گونه‌های مهم کمپیلوباکتر در مدفوع اردک صورت نگرفته است و کلیه گزارشات مربوط به فراوانی گونه‌های مختلف کمپیلو باکتر در پرندگان مربوط به آلودگی لاشه و یا گوشت پرندگانی نظیر مرغ، بوقلمون، بلدرچین و اردک می‌باشد. در این مطالعه که برای اولین بار به منظور بررسی میزان حضور کمپیلوباکتر در مدفوع اردک‌های آزاد برخی مناطق شمال ایران صورت گرفت، از هفتاد و پنج نمونه مورد بررسی 13 مورد (17.3درصد) واجد کمپیلوباکتر شناخته شدند و همانگونه که انتظار میرفت میزان کمپیلوباکتر ژژونی (84.6درصد) به طور معنی‌داری بیشتر از کمپیلوباکتر کولای (15.4درصد) بود.

در مطالعات مختلف صورت گرفته در بیشتر نقاط دنیا میزان آلودگی به کمپیلوباکتر بسیار متغیر است. در مطالعه‌ای که توسط Economu و همکاران در سال 2015 در یونان صورت گرفت، 29درصد از نمونههای گوشت پرندگان واجد کمپیلوباکتر تشخیص داده شدند. درحالی که Wei و همکاران در سال 2016 در کره جنوبی میزان آلودگی به این باکتری را 80.1 درصد گزارش کردند. در مطالعه صورت گرفته توسط  Raeisiو همکاران در سال 2017 در ایران، میزان آلودگی به کمپیلوباکتر در گوشت مرغ 62درصد، بوقلمون 22.5درصد و اردک 33.3درصد گزارش گردید. در همین مطالعه میزان آلودگی به کمپیلوباکتر ژژونی وکمپیلوباکتر کولای به ترتیب در گوشت مرغ 61.3درصد و 22.5درصد، بوقلمون 44.4 و 44.4 درصد و در اردک 70 و 20درصد مشاهده شد(12).

در ارتباط با میزان حضور گونه‌های مختلف کمپیلوباکتر در اردک در مقایسه با پرندگان دیگر مطالعات زیادی صورت نگرفته و گستره حضور این باکتری در مدفوع، گوشت و احشاء، محل پرورش و کشتار اردک‌ها، بسیار متغیر ( صفر تا 96.7درصد) گزارش شده است. شیوع بیش از 80درصد عمدتاً در کشورهایی نظیر انگلستان، تایوان و تانزانیا گزارش شده است. در انگلستان بیشترین میزان آلودگی (96.7درصد) در محل پرورش و فرآوری گوشت اردک گزارش گردید که 74.6درصد آن مربوط به کمپیلوباکتر ژژونی و 25.4درصد مربوط به کمپیلوباکتر کولای بود. درحالی که میزان آلودگی در گوشت اردک 45.4درصد مشاهده شد که 12.5درصد مربوط به کمپیلوباکتر ژژونی و 87.5درصد مربوط به کولای بود (1).

جالب است که تا سال 2011 در کشور غنا هیچگونه آلودگی به این باکتری در اردک‌ها مشاهده نشده است (احتمالاًً مطالعه‌ای در این ارتباط صورت نگرفته است)، درحالی که در سایر کشورهای آفریقایی مانند مصر (19درصد)، نیجریه (63.5درصد) و تانزانیا (80درصد) آلودگی به کمپیلوباکتر در اردک گزارش شده است. در آسیا (ایران، مالزی، و تایوان) میزان آلودگی از 35.5درصد تا 92درصد متغیر است. در ایالات متحده میزان آلودگی به کمپیلوباکتر در گوشت اردک 12.5درصد ثبت گردیده است (1).

Raeisi و همکاران در سال 2017 بیان کردند اختلاف در میزان شیوع آلودگی به کمپیلوباکتر در مطالعات مختلف ممکن است به علت تفاوت در منطقه جغرافیایی مورد مطالعه، فصل، تعداد نمونه، روش‌های نمونه گیری و شرایط بهداشتی متفاوت محل پرورش و کشتار باشد (8،12،19). براساس نتایج Boonmar و همکاران در سال 2007  علت دیگر این تفاوت ممکن است مربوط به حساسیت روش‌های مختلف آزمایشگاهی در شناسایی این باکتری باشد (2). حساسیت روش‌های مولکولی نظیر واکنش زنجیرهای پلیمراز (31درصد) در شناسایی گونه‌های مختلف کمپیلوباکتر، بسیار بیشتر از روش‌های استاندارد مبتنی بر آزمونهای بیوشیمیایی (20درصد) است (2). همچنین  براساس نتایج مطالعه Tsaiو Hsing در سال 2004 آلودگی به کمپیلوباکتر در جوجه اردک‌های زیر دو هفته به طور معنی‌داری کمتر از اردک‌های بالغ می‌باشد (16).

مطالعات Adzitey و همکاران در سال 2012 نشان میدهد در اردک میزان آلودگی به کمپیلوباکتر ژژونی نسبت به سایر گونه‌های کمپیلوباکتر بیشتر است که این الگو مشابه الگوی آلودگی در انسان، پرندگان و سایر حیوانات است. و با نتایچ حاصل از مطالعه حاضر مطابقت دارد.

نتایج این مطالعه نشان می‌دهد میزان حضور کمپیلوباکتر در مدفوع اردک‌های آزادی که در تماس نزدیک با انسان، در روستاهای برخی از مناطق شمال ایران نگهداری می‌شوند، نسبتاً زیاد است و این امر موجب انتشار آلودگی در آب‌های سطحی و محل بازی کودکان شده و  با توجه به گرمادوست بودن این باکتری و بقاء آن در فصول گرم، احتمال ابتلا به عفونت‌های ناشی از کمپیلوباکتر در ساکنین این مناطق به خصوص کودکان بسیار زیاد است.

از آنجایی که اردک‌های آزاد مناطق شمال ایران در تماس نزدیک با جمعیت‌های انسانی مناطق روستایی، طیور بومی و سایر حیوانات نظیر گوسفند، گاو، اسب، سگ و گربه زندگی میکنند، مطالعه مولکولی تنوع ژنتیکی و تعیین قرابت آن‌ها با سویه‌های جدا شده از موارد انسانی بسیار با اهمیت است. به همین خاطر توصیه می‌شود با توجه به گرمادوست بودن باکتری و احتمال افزایش میزان شیوع آن در فصول گرم سال و نیز به دلیل تغییرات فیزیولوژیک ناشی از تغییرات جیره غذایی در دستگاه گوارش پرنده و تأثیر آن در ترکیب جمعیت میکروارگانیسم‌های دستگاه گوارش، حضور این باکتری و تنوع ژنتیکی آن در فصول مختلف سال مورد بررسی قرار گرفته و با سویه‌های جدا شده از موارد انسانی مقایسه گردد. همچنین با توجه به تماس نزدیک اردک‌های این منطقه با  سایر حیوانات  اهلی به نظر می‌رسد علاوه بر کمپیلو باکتر ژژونی و کمپیلوباکتر کولای که گونه‌های غالب در ماکیان و انسان می‌باشند، حضور گونه‌های غالب در سایر میزبان‌ها، در مدفوع این اردک‌ها دور از انتظار نباشد.

 

تشکر و قدردانی

نویسندگان این مقاله  بر خود لازم می‌دانند از زحمات کارکنان آزمایشگاه میکروبشناسی دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران صمیمانه قدردانی نمایند.

 

تعارض در منافع

بین نویسندگان  هیچ گونه تعارض در منافع  گزارش نشده است.

Adzitey, F., Huda, N., Rahmat, G.R. (2012). Prevalence and antibiotic resistance of Campylobacter, Salmonella, and L. monocytogenes in ducks: A Review.  Foodborne Pathog Dis, 9, 498-505. https://doi.org/10.1089/fpd.2011.1109 PMID: 22571641
Boonmar, S., Yingsakmongkon, S., Songserm, T., Hanhaboon, P., Passadurak, W. (2007). Detection of Campylobacter in duck using standard culture method and multiplex polymerase chain reaction. Southeast Asian J Trop Med Pub Health, 38, 728-731.
Colles, F.M., Ali, J.S., Sheppard, S.K., McCarthy, N.D., Maiden, M.C. (2011). Campylobacter populations in wild and domesticated mallard ducks (Anas platyrhynchos). Environ Microbiol Rep, 3, 574-580. https://doi.org/10.1111/j.1758-2229.2011.00265.x  PMID: 22164198
Colles, F.M., Dingle, K.E., Cody, A.J., Maiden, M.C.J. (2008). Comparison of Campylobacter populations in wild geese with those in starlings and free-range poultry on the same farm. Appl Environ Microbiol, 74, 3583-3590. https://aem.asm.org/content/74/11/3583 PMID: 18390684
Economou, V., Zisides, N., Gousia, P., Petsios, S., Sakkas, H., Soultos, N., Papadopoulou, C. (2015). Prevalence and antimicrobial profile of Campylobacter isolates from freerange and conventional farming chicken meat during a 6- year survey. Food Control, 56, 161-168. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2015.03.022
Ganan, M., Silvan, J.M., Martinez-Rodriguez, A.J., Carrascosa, A.J. (2012). Alternative strategies to use antibiotics or chemical products for controlling Campylobacter in the food chain. Food Control, 24, 6-14. http://dx.doi.org/10.1016/j.foodcont.2011.09.027
Gonzalez, I., Grant, K.A., Richardson, P.T., Park, S.F., Collins, M.D. (1997). Specific identification of the enteropathogens Campylobacter jejuni and Campylobacter coli by using a PCR test based on the ceuE gene encoding aputative virulence determinant. J Clin Microbiol, 35, 759-763. PMID: 9041429
Jamali, H., Ghaderpour, A., Radmehr, B., Wei, K.S.C., Ching, C.L., Ismail, S. (2015). Prevalence and antimicrobial resistance of Campylobacter species isolates in ducks and geese. Food Control, 5, 328-330. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2014.09.016
Kaakoush, N.O., Castaño-Rodríguez, N., Mitchell, H.M., Man, S.M. (2015). Global epidemiology of Campylobacter infection. J Clin Microbiol, 28, 687-720. https://doi.org/10.1128/CMR.00006-15
Linton, D., Lawson, A., Owen, R., Stanley, J. (1997). PCR detection, identification to species level, and fingerprinting of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli direct from diarrheic samples. J Clin Microbiol, 35, 2568-2572.
Mohan, V. (2015). Faeco-prevalence of Campylobacter jejuni in urban wild birds and pets in New Zealand. BMC Research Notes, 8, (1-7). https://doi.org/10.1186/1756-0500-8-1 PMID: 25645429
Raeisi, M., Khoshbakht, R., Ghaemi, E.A., Bayani, M., Hashemi, M., Seyedghasemi, N.S., Shirzad-Aski, H. (2017). Antimicrobial resistance and virulence-associated genes of Campylobacter spp. isolated from raw milk, fish, poultry, and red meat. Microb Drug Resist, 23, 925-933. https://doi.org/10.1089/mdr.2016.0183 PMID: 28177853
Shojaei, Kavan, R., Hassanzadeh, M., Bozorgmehri Fard, M.H., Pourbakhsh, S.A., Akhondzadeh, Basti, A., Barin, A., Ashrafi, I. (2015). Detection of cytolethal distending toxin (cdt) Genes in Campylobacter jejuni and Campylobacter coli isolated from the intestinal of commercial broiler chickens, turkey and quail of Iran. Iran J Vet Med, 9, 109-116. https://dx.doi.org/10.22059/ijvm.2015.54009
Somroop, S., Hatanaka, N., Awasthi, S.P., Okuno, K., Asakura, M., Hinenoya, A., Yamasaki, S. (2017). Campylobacter upsaliensis isolated from dogs produces high titer of cytolethal distending toxin. J Vet Med Sci, 79, 683-691. https://doi.org/10.1292/jvms.16-0654 PMID: 28202878
Stucki, U., Frey, J., Nicolet, J., Burnens, A.P. (1995). Identification of Campylobacter jejuni on the basis of aspecies-specific gene that encodes a membrane protein. J Clin Microbiol, 33, 855-859. PMID: 7790451
Tsai, H.J., Hsiang, P.H. (2004). The prevalence and antibiotic susceptibilities of Salmonella and Campylobacter in ducks in Taiwan. J Vet Med Life Sci, 67, 7-12. PMID: 15699587
Wangroongsarb, P., Jittaprasatsin, C., Suwannasing, S. (2011). Identification of Genus Campylobacter and Four Enteropathogenic Campylobacter Species by PCR. J Trop Med Parasitol, 34, 17-29.
Wei, B., Cha, S., Yoon, R., Kang, M., Roh, J., Seo, H., Lee, J., Jang, H. (2016). Prevalence and antimicrobial resistance of Campylobacter spp. isolated from retail chicken and duck meat in South Korea. Food Control, 62, 63-68. http://dx.doi.org/10.1016/j.foodcont.2015.10.013 
Zendehbad, B., Arian, A.A., Alipour, A. (2013). Identification and antimicrobial resistance of Campylobacter species isolated from poultry meat in Khorasan province, Iran. Food Control, 32, 724-727. https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2013.01.035
Zhang, Q. (2013). Campylobacteriosis, In:  Saif, Y. M. (editor in chief), Diseases of Poultry. (13th ed.), Blackwell publishing, New Jersey, US. p 675- 689.