تعیین آنکسین1،۲ A در سرم گوسالههای مبتلا به پنومونی تجربی با باکتری پاستورلا مولتیسیدا

نویسندگان

1 گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

2 مجتمع تولیدی تحقیقاتی انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران

3 گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی دانشگاه تهران، تهران، ایران

چکیده

زمینه مطالعه: آنکسین‌ها پروتئین‌های مهمی هستند که نقش‌هایی همانند هدایت سیگنال‌های داخل سلولی، اتصال اسکلت سلولی غشاء، تکثیر، تمایز و خصوصاً عملکرد ممانعتی در فرآیند التهاب در بدن موجودات زنده را برعهده دارند. پاستورلا مولتیسیدا به عنوان معمول ترین بیماریزای باکتریایی مطرح بوده و شیوع بالایی را در پنومونی‌ها به خود اختصاص می‌دهد. هدف: تعیین آنکسین آ-1 و آنکسین آ-2 در سرم گوساله‌های مبتلا به پنومونی به صورت تجربی با باکتری پاستورلا مولتیسیدا. روش کار: در تحقیق حاضر 10 راس گوساله نر را در محدوده سنی دو تا چهار ماهه انتخاب و به دو گروه مساوی تقسیم نموده، به یک گروه به عنوان گروه تیمار باکتری پاستورلا مولتیسیدا به میزان ml 300 در رقت CFU/ml 109 × 2 و به گروه شاهد ml 300 نرمال سالین از راه دهان و توسط کاتتر مخصوص لاواژ در ناحیه نای تلقیح گردید. بر اساس جداول مخصوص، امتیازات بالینی ثبت گردید و حدود 18 تا 24 ساعت پس از تلقیح باکتری در گوساله‌های گروه تیمار و همزمان با بروز تغییرات بالینی در این گروه، شستشوی برونشی حبابچه‌ای جهت آزمایشات باکتری شناسی و سلول شناسی از مایعات حاصل از شستشو انجام و خون گیری از ورید وداج گوساله‌های هر دو گروه انجام شده و سرم آن‌ها با استفاده از کیت الایزای آنکسین مورد آزمایش قرار گرفتند. نتایج: میزان آنکسین آ-1 و آنکسین آ-2 در سرم خون گروه تیمار، افزایش معنی‌داری را (با استفاده از آزمون تی مستقل) نسبت به گروه کنترل نشان داد (05/0>p). نتیجه گیری نهایی: بنابراین به نظر می‌رسد آنکسین آ-1 و آنکسین آ-2 می‌توانند به عنوان یک بیومارکر مهم در سرم خون برای تشخیص  فرآیند‌های التهابی همچون پنومونی استفاده شود.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Detection of annexin I and annexin II in serum of calves affected by experimental pneumonia with Pasteurella multocida

نویسندگان [English]

  • Mohammad Reza Mokhber Dezfouli 1
  • Masoud Doosti 1
  • Samad Lotfollahzadeh 1
  • Zohre Eftekhari 2
  • Gholam Reza Nikbakht Boroujeni 3
1 Department of Internal Medicine, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
2 Research and Production Complex, Pasteur Institute of Iran,Tehran, Iran
3 Department of Microbiology, Faculty of Veterinary Medicine, University of Tehran, Tehran, Iran
چکیده [English]

BACKGROUND: Annexins (including annexin A1 and annexin A2) are important proteins which have some roles in organisms such as intracellular signal conduction, membrane cellular skeletal connection, cellular proliferation and differentiation, especially inhibitory function in inflammation processing. Pasteurella multocida is the most common bacterial pathogen and has high prevalence in pneumonia. Objectives: This study was aimed to determine experimentally annexin A1 and annexin A2 in the serum of calves affected by Pasteurella multocida pneumonia. Methods: In this research, 10 male calves (2 - 4 months) were allocated to two equal groups, one group as the case: 300 ml in dilution 2×109 CFU Pasteurella multocida bacteria and the other as control group: 300 ml normal saline inoculated by special lavage catheter through oral to trachea. Clinical scores were recorded based on available tables. In treatment group, about 18 to 24 hours after inoculation and synchronous with observation clinical signs changes, bronchoalveolar lavage for cytology and bacteriology examination were done of fluids results from washing. Blood sampling was taken from calves jugular vein in both groups then blood serums were examined by using ELISA kits. Results: The rates of annexin A1 and annexin A2  in blood serum of treatment group showed significant increase (using independent t test) compared to control group (p<0.05). Conclusions: It seems these annexins (annexin A1 and annexin A2) can be used as important biomarkers in blood serum to diagnose inflammation processes such as pneumonia.

کلیدواژه‌ها [English]

  • annexin
  • Pneumonia
  • Pasteurella multocida
  • calves
Gerke, V., Moss, S.E. (2002) Annexins: from structure to function. Physiology News. 82: 331-371.

Moss, S.E., Morgan. R.O. (2004) The annexins. Gen Bio. 5: 219.

Frey, B.M., Reber, B.F., Vishwanath, B.S., Escher, G., Frey, F.J. (1999) Annexin I modulates cell functions by controlling intracellular calcium release. FASEB. 13: 2235-2245.

Goulding,, N.J., Guyre, P.M. (1992) Regulation of inflammation by lipocortin 1. Immunol Today. 13: 295-297.

Kirschnek, S., Adams, C., Gulbins, E. (2005) Annexin II is a novel receptor for Pseudomonas aeruginosa. Biochem  Biophys Res Commun. 327: 900-906.

Malhotra, R., Ward, M., Bright, H., Priest, R., Foster, M.R., Hurle, M., Blair, E, Bird, M. (2003)(Isolation and characterisation of potential respiratory syncytial virus receptoRs) on epithelial cells. Microb Infect. 5: 123–133.

Ulvestad, E., Kristoffersen, E.K., Jensen, T.S., Matre, R. (1994) Identification of a soluble Fc gamma-binding molecule (annexin II) in human serum using a competitive ELISA. APMIS J. Sep. 102: 667-673.

Swisher, J.F., Khatri, U., Feldman, G.M. (2007) Annexin A2 is a soluble mediator of macrophage activation. J Leuko Bio. 82: 1174-1184.

Lillie, L.E. (1974) The bovine respiratory disease complex. Can Vet J. 15: 233-242.

Fulton, R.W., Purdy, C.W., Confer, A.W., Saliki, J.T., Loan, R.W., Briggs, R.E., Burge, L.J. (2000) Bovine viral diarrhea viral infections in feeder calves with respiratory disease: interactions with Pasteurella spp., parainfluenza-3 virus, and bovine respiratory syncytial virus. Can J Vet Res. 64: 151-159.

Welsh, R.D., Dye, L.B., Payton, M.E., Confer, A.W. (2004) Isolation and antimicrobial susceptibilities of bacterial pathogens from bovine pneumonia: 1994--2002. J Vet Diag Invest: official publication of the American Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians. 16: 426-431.

Nikunen, S., Hartel, H., Orro, T., Neuvonen, E., Tanskanen, R., Kivela, S.L., Sankari, S., Aho, P., Pyörälä, S., Saloniemi, H., Soveri, T. (2007) Association of bovine respiratory disease with clinical status and acute phase proteins in calves. Comp Immunol  Mic Infec Dis J. 30: 143-51.

Lago, A., McGuirk, S.M., Bennett, T.B., Cook, N.B., Nordlund, K.V. (2006) Calf respiratory disease and pen microenvironments in naturally ventilated calf barns in winter. J Dairy Sci. 89: 4014-4025.

Radostits, O.C., Gay, C.C., Hinchcliff, K.W., Constable, P.D. (2007) Veterinary medicine, a textbook of the diseases of cattle, sheep, goats, pigs and horses. (10th ed.) London: Bailliere Tindal 2007. London, UK.

Dowling, A., Hodgson, J.C., Schock, A,. Donachie, W., Eckersall, P.D., McKendrick, I.J. (2002) Experimental induction of pneumonic pasteurellosis in calves by intratracheal infection with Pasteurella multocida biotype A:3. Res Vet Sci.  73: 37-44.

Wilkins, P.A., Woolums., A.R. (2015) Diseases of respiratory system. In: Large Animal Internal Medicine. Smith, B.P. (ed.). (5th ed.). New York, USA. p. 596, 597.

Solito, E., Kamal, A., Russo-Marie, F., Buckingham, J.C., Marullo, S., Perretti, M. (2003) A novel calcium-dependent proapoptotic effect of annexin 1 on human neutrophils. FASEB J. 17: 1544-1546.

Arur, S., Uche, U.E., Rezaul, K., Fong, M., Scranton, V., Cowan, A.E., Mohler, W., Han, D.K.(2003) Annexin I is an endogenous ligand that mediates apoptotic cell engulfment. Dev Cell.  4: 587-598.

Tarui, T., Majumdar, M., Miles, L.A., Ruf, W., Takada, Y. (2002) Plasmin-induced migration of endothelial cells. A potential target for the anti-angiogenic action of angiostatin. J Biol Chem.  277: 33564-33570.

McLeod, J.D., Goodall, A., Jelic, P., Bolton, C. (1995) Changes in the cellular distribution of lipocortin-1 (Annexin-1) in C6 glioma cells after exposure to dexamethasone. Bioch Pharma. 50: 1103-1107.

Perretti, M., Christian, H., Wheller, S.K., Aiello, I., Mugridge, K.G., Morris, J.F., Flower, R.J., Goulding, N.J. (2000) Annexin I is stored within gelatinase granules of human neutrophil and mobilized on the cell surface upon adhesion but not phagocytosis. Cell Bio Inter. 24: 163-174.

Getting. S.J., Flower, R.J., Perretti, M. (1997) Inhibition of neutrophil and monocyte recruitment by endogenous and exogenous lipocortin 1. Br J Pharmacol. 120: 1075-1082.

Dreier, R., Schmid, K.W., Gerke. V., Riehemann. K. (1998) Differential expression of annexins I, II and IV in human tissues: an immunohistochemical study. Histochem Cell Biol. 110: 137-48.

Ernst, J.D., Hoye, E., Blackwood, R.A., Jaye, D. (1990) Purification and characterization of an abundant cytosolic protein from human neutrophils that promotes Ca2(+)-dependent aggregation of isolated specific granules. J Clin Invest.  85: 1065-1071.

Oliani, S.M., Christian, H.C., Manston, J., Flower, R.J., Perretti, M. (2000) An immunocytochemical and in situ hybridization analysis of annexin 1 expression in rat mast cells: modulation by inflammation and dexamethasone. Lab Invest. 80: 1429-1438.

Bianchi, R., Giambanco, I., Arcuri, C., Donato, R. (2003) Subcellular localization of S100A11 (S100C) in LLC-PK1 renal cells: Calcium- and protein kinase c-dependent association of S100A11 with S100B and vimentin intermediate filaments. Microsc Res Tech. 60: 639-651.

Peers, S.H., Smillie, F., Elderfield, A.J., Flower, R.J. (1993) Glucocorticoid-and non-glucocorticoid induction of lipocortins (annexins) 1 and 2 in rat peritoneal leucocytes in vivo. Br J Pharmacol. 108: 66-72.

Seemann, J., Weber, K., Gerke, V. (1997) Annexin I targets S100C to early endosomes. FEBS L. 413: 185-19